的负染色是特殊着色的方法来突出胶囊在某些微生物的存在 ， 主要是肺炎链球菌，肺炎克雷伯菌和隐球菌neoformans-，从临床标本或纯培养物。
通常用于进行阴性染色的直接样品是脑脊液。该技术代表了脑膜炎，尤其是新隐球菌的推测性诊断的快速替代方法。
A.用印度墨水染色的牙垢，B。新黑隐球菌var gatti由于其在自然界中的存在而使用黑素进行了微弱的包裹。C.新形成的隐球菌变种加蒂，带有黑质菌素，呈寄生形式，有厚囊。D.用稍微稀释的印度墨水制成的新隐球菌。来自Wikimedia Commons / CDC的Gisell Quinde，通过Wikimedia Commons /照片提供：内容提供商：CDC / Dr。Leanor Haley，通过Wikimedia Commons
同样，该污渍通常可应用于痰液和无菌液体，以及从年轻纯培养物获得的菌株。该技术使用尼古丁或印度墨水执行。因此，这是一种非常简单且便宜的方法，可以在短时间内提供具有重大诊断价值的信息。
从这个意义上讲，任何实验室都可以进行这种染色。当然，实验室必须拥有能识别分离的或发芽的新隐球菌酵母并将其与样品中可能存在的白细胞和假象区分开的胜任人员。
基础
尼古丁和印度墨水的工作方式相似。因此，两种物质中的任何一种都可以互换使用。
这种技术称为负染色，因为它的作用与其余染色技术相反。在这种情况下，仍在寻找的结构或人们希望看到的结构仍然没有改变。即微生物。
因此，染色是基于将涂片底部染成深色。在这种情况下，封装的结构将以浅色或无色突出。
通常，酵母是折射的，被对应于胶囊的透明晕圈包围。发生这种情况的原因是，印度墨水和黑素是无法穿透构成活微生物胶囊的多糖的物质。
值得注意的是，直接样本中可能存在的其他结构（如白细胞或红细胞）也不会渗透。
现在，如果微生物死了，染料会渗透到它们的内部，因此这种染色也可用于评估微生物的生存力。
技术
材料
尼古丁
尼古丁的名字归因于它具有黑色。它是一种合成物质，是通过在上述反应中使用催化剂（铁或铜）加热有机化合物（如次氮苯，苯胺和苯胺盐酸盐）的混合物而获得的。
中国墨水
中国墨水主要是亚洲人用来书写，制作艺术品和单色绘画的物质。它在中国文化中很受欢迎。
它是由乌贼墨和木炭粉混合而成的，木炭粉是燃烧低树脂树的产物。
也可以从烃类（植物油）的焚烧烟灰中制备，再加上蛋白质明胶，使其具有适当的稠度以避免碳颗粒沉淀。
采样规格
-不需要禁食。
-脑脊液，痰液或无菌液体样品的体积必须至少为1 ml，并且必须立即在室温下转移到实验室。
-脑脊液和无菌液体样本必须由专业医生进行。
-也可以是与上述病原体有关的可疑菌株的纯培养物。
使用直接样本执行该技术
-必须将样品离心，然后弃去上清液并取出沉淀物。
-将一滴离心物质（沉淀物）和一滴印度墨水或尼古丁滴在干净的载玻片上。
-必须将其充分混合并盖上盖玻片，以使液滴以薄膜形式散开而不会超出边缘。
-随后，将制剂安装在显微镜上。
-如果制剂太黑，则可以用水稀释。
用来自培养物的菌株执行该技术
-用种针取一小部分年轻培养物，并溶解在先前放在干净载玻片上的一滴印度墨水中。
-盖玻片放在顶部。
-在显微镜下以10倍然后40倍观察。
您也可以将一部分菌落溶解在蒸馏水中，然后滴一滴，并与印度墨水混合。这样，准备工作不会太厚，可以孤立地观察结构。如果有人群，将无法很好地观察到。
另一个方法如下：
-将一滴悬浮培养物放在玻片的一端。
-在同一端放一滴尼古丁并混合。
-借助另一张幻灯片，像进行血液学涂片一样散布样品。
-让其干燥并在显微镜下观察。
显微镜观察
您必须首先以10倍的目标聚焦，才能广泛了解该领域。随后，应寻求是否有空白处；如果有，请聚焦40倍以查看详细信息。
优点
-易于执行。
-这是一种廉价的技术。
-此方法不需要将涂片固定在热源或化学制品上；因此，观察到的微生物没有变形。
-新鲜的制剂无需干燥，因此可以立即观察到，迅速产生结果。
坏处
组装完成后，必须立即观察新鲜的制剂。如果允许它们干燥，就无法再观察它们了，必须安装新的。
用印度墨水对组织进行染色
印度墨水可以实现的另一个功能是在病理实验室中。将其应用于手术提取的组织样本，以标记肿瘤的切除切缘。
标记的组织喷有乙酸。当组织经过活检准备的常规处理时，这起到了媒染剂的作用，并防止了墨水泄漏。
该过程包括将组织浸入酒精和二甲苯中，然后将其浸入石蜡中。该标记在观察组织时指导病理医生，指示手术切除切缘或其他兴趣点在哪里。
参考文献
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