水生栖热菌是一种嗜热细菌,由托马斯·布洛克(Thomas Brock)于1967年发现,位于Phylum Deinococcus-Thermus。它是革兰氏阴性,异养性和好氧微生物,具有热稳定性作为内在特性。
它是从黄石国家公园和北美加利福尼亚州的各种温泉中获得的,温度介于50°C至80°C,pH 6.0至10.5之间。它也已从人工热栖息地中分离出来。
水生栖热菌。细菌沉积在0.22μm的Millipore过滤器上(比例= 1μm)。
它构成了耐热酶的来源,这些酶在不同的变性循环中都可以存活。在这种情况下,蛋白质和酶是生物技术行业特别感兴趣的。
这就是构成酶的酶在基因工程,聚合酶链反应(PCR)中以及科学和法医学研究工具中的用途(Williams and Sharp,1995)。
一般特征
黄石公园间歇泉。水生栖热菌是从间歇泉中分离出来的。资料来源:
克阴性
水生栖热菌(Thermus aquaticus)在进行革兰氏染色时会获得紫红色。这是因为肽聚糖壁非常薄,因此染料颗粒不会被困在其中。
栖息地
这种细菌被设计成可以承受极高的温度。这意味着它们的自然栖息地是地球上温度超过50°C的地方。
从这个意义上说,这种细菌是从间歇泉中分离出来的,最常见的是黄石国家公园的那些。来自世界各地的温泉以及人工热水环境。
有氧运动
这意味着水生栖热菌是一种细菌,必须处于为其提供氧气供应的环境中才能进行其代谢过程。
是嗜热的
这是水生栖热菌的最具代表性的特征之一。该细菌是从温度极高的地方分离出来的。
水生栖热菌是一种非常特殊且具有抗药性的细菌,因为在其所支持的最高温度下,大多数生物中的蛋白质都会变性且不可逆转地停止发挥其功能。
该细菌的生长温度范围为40°C至79°C,最佳生长温度为70°C。
它是异养的
像任何异养生物一样,该细菌需要环境中存在的有机化合物才能发育。有机物的主要来源是周围环境以及周围土壤中存在的细菌和藻类。
它在弱碱性环境中壮成长
水生栖热菌能在不失去其功能的蛋白质的情况下生长的最佳pH在7.5至8之间。值得记住的是,pH范围内的7为中性。在此之上是碱性,在其之下是酸性。
产生大量酶
水生栖热菌(Thermus aquaticus)是一种微生物,由于其在高温环境中的生活能力而在实验水平上非常有用。
很好,通过大量研究,可以确定它合成了许多酶,奇怪的是,它们在相同温度下在其他微生物中会变性并丧失其功能。
研究最多的是水生栖热菌合成的酶。
- Aldolasse
- Taq I限制酶
- DNA连接酶
- 碱性磷酸酶
- 异柠檬酸脱氢酶
- 淀粉酶
系统发育和分类学
该微生物采用经典方法构建:
- 王国:细菌
- 炸药:Deinococcus- Thermus
- 类别:Deinococci
- 订购:Thermales
- 家庭:菊科
- 属:Thermus
- 种类:水生栖热菌。
形态学
水生栖热菌属于杆状细菌(杆菌)。细胞的大小约为4至10微米。在显微镜下可以看到非常大的细胞,以及小的细胞。它们在细胞表面没有纤毛或鞭毛。
水生栖热菌细胞具有一个膜,该膜又由三层组成:内部等离子层,外部粗糙外观和中间层。
这种细菌的显着特征之一是在其内膜中有一些看起来像杆的结构,被称为圆形物体。
同样,这些细菌在其细胞壁中几乎不含肽聚糖,并且与革兰氏阳性细菌不同,它含有脂蛋白。
当暴露在自然光下时,细菌的细胞会变成黄色,粉红色或红色。这是由于细菌细胞中含有色素。
遗传物质由其中包含DNA的单个圆形染色体组成。其中约65%由鸟嘌呤和胞嘧啶核苷酸组成,胸腺嘧啶和腺嘌呤核苷酸占35%。
生命周期
通常,细菌,包括水生T.,通过细胞分裂无性繁殖。单个DNA染色体开始复制;由于存在一种称为DNA聚合酶的酶,它可以复制以将所有遗传信息遗传给子细胞。在20分钟内,新染色体完成并固定在细胞中。
分裂继续,在25分钟后,两条染色体开始复制。38分钟后,该单元的中心会出现分裂。子细胞呈现分裂,被壁隔开,在45-50分钟结束无性分裂。(Dreifus,2012年)。
细胞结构与代谢
由于它是革兰氏阴性细菌,因此具有肽聚糖所在的外膜(脂蛋白层)和周质(水膜)。没有观察到纤毛或鞭毛。
这些嗜热生物的脂质组成必须适应其所处环境温度的波动,以维持细胞过程的功能,而又不会失去避免在高温下溶解所需的化学稳定性(Ray等人。 1971)。
另一方面,水生T. aquaticus已成为热稳定酶的真正来源。Taq DNA聚合酶是一种通过产生双键来催化底物裂解的酶,因此它与裂解酶型酶(催化键释放的酶)有关。
由于它来自嗜热细菌,因此可以抵抗高温下的长时间孵育(Lamble,2009)。
应该注意的是,每个生物都具有用于其复制的DNA聚合酶,但是由于其化学成分,它不能抵抗高温。这就是为什么taq DNA聚合酶是用于扩增人类基因组以及其他物种基因组的主要酶的原因。
应用领域
扩增片段
该酶的热稳定性使其可用于通过体外复制扩增DNA片段的技术,例如PCR(聚合酶链反应)(Mas and Colbs,2001)。
这需要初始和最终引物(为DNA合成提供起点的短核苷酸序列),DNA聚合酶,三磷酸脱氧核糖核苷酸,缓冲液和阳离子。
将具有所有元素的反应管放置在94到98摄氏度之间的热循环仪中,以将DNA分成单链。
开始使用底漆,并在75-80摄氏度之间再次发生重新加热。从DNA的5'端开始合成。
这是使用热稳定酶的重要性。如果使用任何其他聚合酶,则在进行该过程所需的极端温度下会被破坏。
Cetus Corporation的Kary Mullis和其他研究人员发现,在DNA热变性的每个循环后都无需添加酶。该酶被克隆,修饰并大量生产用于商业销售。
催化生化反应
在80℃以上的面包生产中,热稳定性丝氨酸肽酶aqualysin1从水生T.水解麸质开始。
由此,研究了热稳定面筋对面包屑质地的相对贡献(Verbauwhede and Colb,2017)。
多氯联苯化合物的降解
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