的伏-普试验是用于在属于肠杆菌科的细菌的识别，以帮助一个生化试验。对于区分大肠杆菌与克雷伯氏菌和肠杆菌等菌株特别有用。
该测试在称为Methyl Red – Voges Proskauer的液体培养基中进行，该液体培养基的首字母缩写为RM / VP。该介质由缓冲的聚pe，葡萄糖，磷酸氢二钾和蒸馏水组成。
甲基Red-Voges Proskauer（RM / VP）商业培养基/ VP分别测试阳性和阴性。资料来源：作者MSc摄。Marielsa Gil / Sudipta.nov15，来自Wikimedia Commons
当前的RM / VP培养基是Clark和Lubs培养基的改良版，最初含有较低浓度的蛋白ept和葡萄糖。因此，产生了正Voges-Proskauer反应所需的较少氢离子。
该测试基于微生物在氧气和碱性pH的存在下通过丁二醇路径使用葡萄糖并形成称为丙酮的中性终产物的能力。
在RM / VP介质中，除了可以显示Voges-Proskauer测试外，还可以显示甲基红测试。
基础
Voges-Proskauer考试依据
培养基中存在的pluripeptones为细菌的生长提供了基本的营养需求。就其本身而言，葡萄糖是主要化合物。许多细菌具有代谢葡萄糖并形成丙酮酸的能力。
丙酮酸是葡萄糖代谢的中间点，每种微生物从那里可以采取不同的途径。一些会形成混合酸，例如乳酸，乙酸，甲酸和琥珀酸，其他一些会形成中性产物，例如2,3-丁二醇。
Voges-Proskauer试验揭示了微生物在有氧条件下形成2，3-丁二醇中间产物乙酰甲基甲醇（乙醛）的能力。
乙醛还原并形成2,3-丁二醇，但该反应是可逆的，因此，如果2,3-丁二醇被氧化，则会形成乙醛。因此，氧气是必不可少的。
磷酸氢二钾是在pH 6.9±0.2下缓冲混合物的缓冲液。
证据公开和解释依据
为了证明该反应，必须使用称为Voges A和Voges B的两种试剂（Barrit试剂）进行显影。
Voges A是5％的α-萘酚溶液，而Voges B是40％的氢氧化钾制剂。如果没有氢氧化钾，可用40％的氢氧化钠代替。
α-萘酚是一种催化剂，可以增加反应颜色的强度，从而使测试更加灵敏。必须始终先添加α-萘酚，并摇动试管，以使介质与氧气接触。以这种方式，存在的乙酰丙酮被氧化成二乙酰，而2，3-丁二醇被氧化形成乙酰丁，将其传递给二乙酰。
这就是α-萘酚与二乙酰基结合的方式，二乙酰基又与存在于氨基酸精氨酸中的胍核结合，后者来自多聚肽。
就其本身而言，氢氧化钾或氢氧化钠负责吸收CO 2并与蛋白ept反应。该反应会导致形成鲑鱼粉红色，将其摇匀后清晰可见。
必须混合正确量的二乙酰基，蛋白ept和α-萘酚，以使颜色立即出现。如果这种情况没有发生，则在解释前，让试管静置15分钟。
该测试通常在2至5分钟后呈阳性，此时可以看到淡淡的粉红色。如果静置30分钟到1小时，颜色的强度将最大（深红色）。
当肉汤变成黄色时，将显示阴性测试。1小时后，如果测试结果是否定的，则可能是由于氢氧化钾与α-萘酚反应而形成铜色。
制备
中级MR / VP
称重17 g脱水培养基，并溶于一升蒸馏水中。静置5分钟。加热煮沸以完全溶解。服务3至4毫升的试管中，并在121°C的高压釜中灭菌15分钟。
脱水的培养基为米色，制备的培养基为浅琥珀色。
培养基的最终pH为6.9±0.2。
呕吐一种试剂
称取5 gα-萘酚，溶于50 ml乙醇（无水）中。然后继续添加乙醇，直到达到100毫升。
Voges B试剂
称出40克氢氧化钾，并在烧杯中溶于50毫升蒸馏水。必须将玻璃杯放在冷水浴中以控制温度，因为当制剂溶解时，温度会急剧上升。
溶液冷却后，将其转移至容量瓶中，并用蒸馏水补足至100 mL。
Voges-Proskauer测试程序
为了进行Voges-Proskauer测试，将被研究的微生物从纯培养物中接种RM / VP肉汤18至24小时。
接种物应不致密。将其在35-37°C下孵育24至48小时，尽管有时需要孵育几天。Cowan和Steel认为5天是检测肠杆菌科所有阳性Voges-Proskauer（VP）物种所需的最短孵育时间。
测试开发
将1 mL等分试样移入试管中，并按照以下步骤进行显影：将12滴（0.6 mL）的Voges A试剂和4滴（0.2 mL）的Voges B放置。混合以充气并静置。口译前5-10分钟。但是，如果测试仍为阴性，请静置30分钟至1小时，然后观察试管。
粉红红色的出现表明Voges-Proskauer反应为阳性。如果介质保持黄色，则反应为阴性。
按指示的顺序和数量添加开发人员对于避免误报至关重要。
用
Voges-Proskauer检验可用于区分VP阴性的大肠埃希氏菌，克雷伯菌，肠杆菌，沙雷氏菌属等VP阳性的大肠埃希氏菌。
资料来源：Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
质量检查
对照菌株可用于测试制备的培养基的质量，包括大肠杆菌ATCC 25922，肺炎克雷伯氏菌ATCC 700603，奇异变形杆菌Proccus ATCC 43071，鼠伤寒沙门氏菌和阴沟肠杆菌ATCC 13047。
预期结果仅对肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌有积极的Voges-Proskauer反应。其余的产生负面反应。
参考文献
- 大不列颠实验室。MR-VP中。2015.可在以下网址获得：www.britanialab.com
- Microkit实验室。M-Ident Voges Proskauer。2014年。可用：http：//www.medioscultivo.com
- Mac Faddin J.（2003）。生化测试用于鉴定具有临床重要性的细菌。第三版。社论泛美。布宜诺斯艾利斯。阿根廷。
- 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。
- Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。