的单染色是一个染色过程快速而简单的,其中使用一个单一的染料,因此它被称为简单。它主要用于确定样品中存在的细胞的形态和组织。
细胞自然是无色的,因此在显微镜下观察时必须使它们以某种方式可见。
人脸颊细胞通过简单的亚甲蓝染色染色。
重要的是要注意,简单染色中使用的染料必须是带正电荷(阳离子)的碱性染料,这样它们才能自发结合细胞壁和细胞质。
这些细胞结构带负电。这就是带正电荷的染料被细胞吸引并自发结合的原因。因此,样品中存在的所有细胞都会被快速染色。
简单染色中使用的染料
在微生物学实验室中可以使用几种基本的污渍。最常用的是:
- 亚甲蓝。
-紫水晶。
-孔雀石绿。
-基本的品红。
所有这些染料在细菌中均能很好地发挥作用,因为它们具有带正电的(阳离子)色离子(发色团)。
大多数这些污渍的染色时间相对较短。它们通常为30秒至2分钟,具体取决于染料的亲和力。
重要的是要记住,在通过简单的染色对样本进行染色之前,必须将其延伸并固定到载玻片(载玻片)上。扩展且固定的样本称为拖影。
简单染色的6个步骤
第1步
将载玻片放在染色架上,然后涂上所需的染色剂。让相应的时间起作用。
简单的染色通常需要几秒钟到几分钟,这取决于所用的染色剂。
观察
在这一步骤中,重要的是不要超过所用染料的推荐时间,因为可能会在薄片上形成晶体,从而产生扭曲细胞形态的所谓“伪像”。
第2步
用瓶中的蒸馏水或缓慢流动的自来水彻底冲洗载玻片上的污迹,直到径流变清为止。这通常需要5到10秒。
观察
不要将水流直接涂在涂片上,以免同样的力损坏样品。
如果没有蒸馏水,则可以使用自来水而不会出现问题,因为它不会影响染色的结果。
第三步
用吸水纸巾沿一个方向吸干玻片,不要摩擦。确保幻灯片的底部清洁。
第4步
在显微镜下观察染色的涂片。首先从最远的目标开始,以正确地定位要更详细观察的区域。改变物镜,使其越来越接近样品。
观察
为了使用更高放大倍率的物镜(通常为100倍),应使用浸油,因为这可以帮助光线更好地穿透并且图像更清晰。无需使用盖玻片。
第5步
最后,将所有样品处理在适当的带有“生物危害”标签的容器中。
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