在暗视野显微镜在某些实验室中使用一种特殊的光学仪器。这是对明场显微镜进行修改的结果。暗场显微镜可以通过透射照明或落射照明完成。
第一种是基于通过使用在光线到达聚光器之前插入的装置来直接阻挡到达聚光器的光线。
暗场显微镜/在暗场显微镜中观察到的Treponemes。资料来源：Dietzel65 / Judith Miklossy，Sandor Kasas，Anne D Zurn，Sherman McCall，Sheng Yu和Patrick L McGeer
带有透射光的暗场可以突出显示结构，从而可以观察到极细的颗粒。在深色背景上看到的结构有些折射或明亮。
而落射照明效果是通过入射或倾斜光实现的。在这种情况下，显微镜必须配备特殊的月牙形滤镜。
对于入射光，观察到的结构的特征是呈现出高浮雕的视觉效果。该特性使得可以突出悬浮颗粒的边缘。
与明场显微镜不同，暗场显微镜对于可视化包含悬浮颗粒且没有任何染色的壁画玻片特别有用。
但是，它有几个缺点，包括不能用于干制剂或染色制剂。它的分辨率不高。另外，为了确保良好的图像，物镜的数值孔径不能超过聚光镜的数值孔径。
特点
暗场显微镜的组成对明场有重要的修改，因为两种显微技术的基本原理是相反的。
而在明亮的视野中，光线会聚，以便它们直接穿过样品，而在黑暗的视野中，光束会被散射，从而只有倾斜的光束才能到达样品。然后，它们被同一样本分散，将图像传输到物镜。
如果将焦点放在没有样品的幻灯片上，则会观察到一个黑眼圈，因为没有样品，就不会有任何光散射到物镜。
为了在视野中获得理想的效果，需要使用特定的聚光镜以及有助于控制光束的光圈。
在暗视场中，悬浮液中的元素或粒子显得明亮且折射，而其余视场则暗，形成了完美的对比度。
如果使用倾斜或入射光，则在观察到的结构中会获得高度浮雕的边缘效果。
暗场显微镜的零件
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-机械系统
管
物镜反射并放大的图像将通过该设备传播，直到到达目镜为止。
搅拌
这是支持不同目标的地方。目标不是固定的，可以将其删除。左轮手枪的旋转方式可以在操作员需要时改变目标。
宏螺丝
该螺钉用于聚焦标本，它向前或向后移动以使标本靠近或远离目标，并且移动是怪诞的。
千分尺螺丝
千分尺螺钉向前或向后移动，以使样本更靠近或远离目标。测微螺丝用于非常细微或微妙的运动，几乎看不见。它是获得最终关注的对象。
滚筒
样本将被放置在载玻片上。它有一个中央开口，光束穿过该中央开口。移动宏螺丝和千分尺螺丝时，平台会根据螺丝的移动而上下移动。
车子
托架允许整个样品随物镜移动。允许的移动是来回移动，反之亦然，从左到右，反之亦然。
夹持钳
它们位于舞台上，由金属制成，其功能是固定幻灯片，以防止在观察过程中滚动。重要的是在观察样本时保持样本固定。紧固件的尺寸正确，可以容纳滑轨。
手臂或把手
手臂将管子与底座连接起来。当要将显微镜从一侧移到另一侧时，必须在此放置显微镜。一只手抓住手臂，另一只手握住底座。
底脚
顾名思义，它是显微镜的基础或支撑。多亏了底座，显微镜才能在平坦的表面上保持固定和稳定。
-光学系统
目标
它们是圆柱形的。他们在底部有一个镜头，可以放大来自样品的图像。物镜可以具有各种放大倍率。示例：4.5倍（放大镜），10倍，40倍和100倍（浸没物镜）。
之所以称其为“浸入式物镜”，是因为它需要在物镜和样品之间放置几滴油。其他被称为干靶。
印有目标的特征。
示例：制造商的品牌，像场校正，像差校正，放大倍率，数值孔径，特殊光学特性，浸没介质，管长，焦距，盖玻片厚度和编码环颜色。
镜头的前部镜头位于底部，后部镜头位于顶部。
目镜
旧显微镜是单目镜，即只有一个目镜，而现代显微镜是双筒镜，即有两个目镜。
目镜为圆柱形且中空。它们内部具有会聚透镜，可扩展由透镜创建的虚像。
目镜接管。后者使物镜传输的图像到达目镜，目镜将再次放大。
目镜在其上部包含称为目镜的透镜，而在其下部则包含称为收集器的透镜。
它也有一个膜片，并根据其位置将有一个名称。位于两个透镜之间的透镜称为惠更斯目镜，如果位于两个透镜之后，则称为拉姆斯登目镜。虽然还有很多。
目镜的放大倍率在5倍，10倍，15倍或20倍之间，具体取决于显微镜。
操作员可以通过目镜观察样品。某些型号的左目镜上有一个可移动的环，可以调节图像。这种可调环称为屈光度环。
-照明系统
灯
它是照明源，位于显微镜的底部。光是卤素，从下往上发出。通常，显微镜使用的灯为12V。
膜片
暗视场显微镜的光阑上没有虹膜。在这种情况下，这可以防止来自灯的光线直接到达样品，只有倾斜的光束会接触到样品。被样品中存在的结构分散的那些光束是将通过目标的那些光束。
这解释了为什么结构在暗场中看起来明亮而发光。
冷凝器
暗视野显微镜的聚光镜不同于明视野的聚光镜。
有两种类型：折射电容器和反射电容器。后者又分为两类：抛物面和心形。
折射电容器
这种类型的聚光镜有一个可折射光线的圆盘，它可以位于前透镜上方或背面。
即兴创作这种类型的聚光镜非常容易，因为它足以在聚光镜的前透镜前面放置一个由黑纸板制成的圆盘，该圆盘小于透镜（膜片）。
使用此技巧可以将明场光学显微镜转换为暗场显微镜。
反射电容
它们是立体显微镜所使用的。有两种类型：抛物面和心形。
- 抛物面：由于其与抛物线的相似性，它们具有一种称为抛物面的曲率。这种类型的冷凝器被广泛用于梅毒的研究，因为它可以观察到Treponemes。
- 心形：聚光镜的曲率类似于心脏，因此命名为“心形”，聚光镜具有相同的名称。它具有可调节的隔膜。
特征
-用于研究临床样本中存在梅毒螺旋体。
-观察疏螺旋体和钩端螺旋体也很有用。
-对于观察细胞或微生物的体内行为是理想的，只要不需要详细说明特定结构即可。
-理想的是突出显示胶囊或微生物壁。
优点
-带折射聚光镜的暗视野显微镜更便宜。
-在40倍放大倍率下非常有用。
-它们是观察折射率与发现介质相似的样品的理想选择。例如，培养物中的细胞，酵母菌或运动性细菌，例如螺旋体（疏螺旋体，钩端螺旋体和螺旋体）。
-可以在体内观察到细胞，从而可以评估其行为。例如，布朗运动，鞭毛运动，假足的发射运动，有丝分裂的过程，幼虫的孵化，酵母的出芽，吞噬作用等等。
-它可以突出显示结构的边缘，例如胶囊和细胞壁。
-可以分析分解的颗粒。
-无需使用着色剂。
缺点
-安装制剂时必须特别小心，因为如果它们太厚，将无法很好地观察到。
-图像的分辨率低。
-使用折射聚光镜的暗视野显微镜的光度百分比非常低。
-为了使用浸入式物镜（100X）改善图像质量，必须减小物镜的数值孔径，从而增加照明锥的数值孔径。为此，必不可少的是附加一个可以调节物镜数值孔径的光圈。
-除非它们是重要的染料，否则您无法看到干燥的制剂或有色制剂。
-不允许可视化某些结构，尤其是内部结构。
-暗视野显微镜更昂贵。
参考文献
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