的改良罗氏培养基是用于分枝杆菌属的细菌，例如结核分枝杆菌，鸟分枝杆菌，除其他的分离和发展的选择性固体培养基，与麻风杆菌物种的例外，这是不可培养。
分枝杆菌属细菌不能在常规培养基中生长，因此有必要设计一种特殊的培养基对其进行分离。原始媒体是由Löwenstein创建的，后来由Jensen修改了。
具有结核分枝杆菌菌落的Löwenstein-Jensen培养基。资料来源：Agarwal等/ BioMed Central Ltd.，由Biology Image Library提供
改性包括消除刚果红染料，用更高浓度的孔雀石绿代替。它还改变了柠檬酸镁和磷酸一钾的浓度。
Löwenstein-Jensen培养基当前包含马铃薯淀粉，天冬酰胺，柠檬酸镁，磷酸二氢钾，硫酸镁，孔雀石绿，萘啶酸，环己酰亚胺，林可霉素，打蛋，甘油和水。
分枝杆菌通常从非无菌部位分离，例如痰，尿液，脓肿等。这意味着大多数样品将包含该区域的常见微生物群以及病原体。
这就是为什么Löwenstein-Jensen培养基的组成中含有一系列以孔雀石绿，抗生素和抗真菌药为代表的抑制剂。
此外，来自非无菌场所的样品必须先经过去污和中和后才能播种到Löwenstein-Jensen培养基中。
基础
Löwenstein-Jensen培养基中鸡蛋和甘油的存在会刺激分枝杆菌的生长，因为它们提供了这些微生物发育所需的脂肪酸和蛋白质。
Löwenstein-Jensen培养基含有孔雀石绿，它是伴随微生物的抑制剂。但是，它还含有抑制革兰氏阴性菌群的萘啶酸（35 µg / mL），抑制腐生真菌和酵母菌的环己酰亚胺（400 µg / mL）和抑制革兰氏阳性菌群的林可霉素（2 µ / mL）。
一些商品房更喜欢添加以下抗生素组合：多粘菌素B 200,000单位/ L，两性霉素B 10 mg / L，羧苄青霉素50 mg / L和甲氧苄啶10 mg / L。
该培养基不含琼脂，因此由于灭菌过程中鸡蛋中存在的白蛋白凝结而发生培养基的固化。
制备
在600毫升蒸馏水中（已预先添加12毫升甘油）中称量37.3克脱水培养基。加热混合物，经常搅拌直至完全溶解。将培养基在121°C高压灭菌15分钟。
另一方面，应在无菌条件下制备1000毫升新鲜鸡蛋的均质悬浮液。将鸡蛋悬浮液添加到在50-60°C的温度下制备的600 ml培养基中，避免产生气泡。
在高压灭菌器中灭菌后，还会添加抗生素溶液。
将培养基倒入无菌的旋盖试管中。在85°C的倾斜位置加热45分钟。
所制备培养基的颜色为海蓝绿色，由于存在鸡蛋脂质，可能会出现白色斑点。
培养基的pH值必须为7.2±0.2
将试管存放在冰箱中，并避免直射光，直到使用。播种前要回火。
有一种称为“LöwensteinJensen的Gruft修改”的媒体修改。它包含与经典培养基相同的化合物，但添加了RNA-5mg / 100mL，并作为抑制剂包含了孔雀绿0.025g / 100mL，青霉素50U / mL和萘啶酸35ug / mL。
应用领域
Löwenstein-Jensen培养基用于从各种类型的样品中分离分枝杆菌。对于怀疑存在分枝杆菌的任何标本，建议使用Ziehl-Neelsen染色。
一些样品来自无菌场所，而另一些则不是。非无菌样品必须适当消毒：
痰
痰液样品应按以下方式进行净化：确定痰液样品的量（毫升），并向样品中添加相同量的4％NaOH，并在37°C下孵育。
在30分钟内经常摇晃混合物。随后以3000 RPM离心30分钟。
丢弃上清液在酚类消毒剂溶液上。使用沉淀物播种，但首先必须中和pH。
为了中和沉积物，在酚红指示剂的存在下使用5％H 2 SO 4直至其达到导致鲑鱼色的中性pH。
洗胃，支气管灌洗和支气管抽吸
在这种情况下，样品必须以3000 RPM离心30分钟。丢弃上清液并使用沉淀。要净化沉积物，请加入3 ml 4％NaOH，并在37°C下频繁搅拌半小时。
再次离心，弃去上清液并使用沉淀。后者必须按照痰液样本中的说明进行中和。
尿
让样品在冰箱中静置24小时。分离上清液。剩余的沉淀应在3000 RMP下离心30分钟。再次丢弃上清液，并用3 ml无菌生理溶液重建沉淀。
如前所述，加入3 ml 4％NaOH，然后进行去污和中和。
腹水，胸膜液，脑脊液
在这种类型的样品中，将其离心并丢弃上清液。对沉积物进行革兰氏分析或直接在显微镜下观察；如果未观察到细菌，则不需要去污步骤，也不需要中和步骤。
在这种情况下，可以使用沉积物直接播种样品。如果有细菌，请按照上述说明进行去污和中和。
活检
对于这种类型的样品，必须添加5 ml蒸馏水，然后以1500 RPM的速度离心10分钟。弃去上清液，将沉淀以3500 RPM的速度重新离心30分钟。使用沉淀物播种培养基。
喉拭子
拭子应放在装有等量蒸馏水和4％NaOH的无菌管中。必须将药签压在管壁上，以便将样品稀释在液体中。离心并使用沉淀物。如上所述，中和沉积物。
播种
通过在培养基表面添加0.5 ml样品来接种Löwenstein-Jensen培养基。旋转试管以将样品分配到整个培养基中。请勿使用铂金手柄。
可以接种第二个装有Stonebrink培养基的试管，以分离牛分枝杆菌和其他不在Löwenstein-Jensen培养基上生长的物种。
孵化
接种后的试管在37°C需氧条件下孵育，盖稍松，倾斜约5°，并避光。5–10％的二氧化碳可以丰富环境。每周两次检查培养物，直到出现菌落。
样品吸收后，拧紧瓶盖。最长孵育时间为8周，如果这段时间后没有任何生长，则报告为阴性。
质量检查
以下菌株可用作质量控制：
结核分枝杆菌ATCC 27294，堪萨斯分枝杆菌ATCC 12478，鸟分枝杆菌ATCC 19291，牛分枝杆菌ATCC 19219，福特分枝杆菌ATCC 6841，大肠杆菌ATCC 25922，化脓性链球菌ATCC 19615，ATCC球菌320的隐球菌320 of ATCC的19615
预计前三个物种将有出色的发展，因为For。M. fortuitum的生长应该很好，而对于M. bovis，几乎没有或没有增长。同时，必须完全抑制分枝杆菌属以外的物种。
局限性
所制备的介质必须避免光线照射，长时间暴露在光下会导致介质从绿色变为蓝色，在这种情况下，将无法使用该介质。这是因为孔雀石绿是光敏的。
如果其中的鸡蛋不经过无菌处理，则很容易被污染。如果被蛋白水解细菌污染，则可以溶解。
分枝杆菌属细菌的培养和操作需要合格的人员，他们了解必须采取的生物安全措施，以避免被污染或污染他人。
由于形成了氯化钠，氯化钠不能用于中和步骤，因为氯化钠可能会对科赫芽孢杆菌有毒。
在不处理样品时，应保持样品冷藏并避光。
参考
- Francisco Soria Melguizo实验室。2009。Löwenstein-Jensen选择性培养基。网址：f-soria.es
- 大不列颠实验室。2017年。Löwenstein-Jensen媒体。网址：britanialab.com。
- Neogen实验室。Löwenstein-Jensen媒介。请访问：foodsafety.neogen.com。
- “Löwenstein-Jensen媒介。” 维基百科，免费百科全书。2018年11月20日，世界标准时间15:15。2019年四月24日，18:34。wikipedia.org
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