的刚果红是通过偶联重氮盐和活性芳族环形成的蛋白质的偶氮染料。该物质能够吸收可见光谱中的电磁辐射,这就是为什么它具有强烈的颜色的原因。
它带负电。因此,它对带正电的细胞成分(例如某些蛋白质物质)具有亲和力。其颜色根据pH值而变化。在这种意义上,如果介质是酸性的(<pH3),则颜色是深蓝色。在pH3-pH 5.2之间为紫红色(转向区),而在pH 5.2以上时,颜色为深红色。
脱水刚果红和刚果红胶体溶液。资料来源:Pixinio.com和Wikipedia.com
它具有多种用途,是一种用途非常广泛的物质。它已在纺织工业中用作着色剂,还用于电池和织物。
还可以制造用于测量酶促作用的培养基,作为pH指示剂,作为对照物质,以评估分光光度计的正常功能,研究生物膜的形成或诊断淀粉样蛋白。
同样,通过鉴定细菌和真菌血清壁中的特定结构(脂多糖),可以区分细菌和真菌血清型。
刚果红的特征
该物质由Böttiger于1884年发现。它是联苯胺的双重氮酸与萘甲酸形成的重氮衍生物。刚果红分子的大小为21 Armstrong,分子量约为8000 g / mol。
刚果红的特征是可溶于水,甚至更溶于有机溶剂(如乙醇)中,形成胶体溶液。
它对纤维素,淀粉样蛋白组织和带正电的细胞成分具有亲和力。
制备
根据所使用的技术,刚果红的制备浓度不同。大多数使用刚果红的比例为1%,2%,0.1%。
例如,要制备2%的刚果红,应称量2克脱水食用色素并添加100毫升蒸馏水。然后将其保存在琥珀色的瓶子中。
应用领域
作为纺织业的着色剂
一段时间以来,由于它固定在棉花上,因此在纺织工业中得到广泛使用,但是由于它具有致癌作用,并且因为颜色不稳定,因摩擦而变色,因此目前已被废弃。
测定生物膜形成能力
微生物的生物膜形成能力已被证明是一种致病因子。
从这个意义上说,刚果红染料被用作确定生物膜形成的方法。刚果红与生物膜中存在的胞外多糖结合。但是,与其他方法相比,由于出现高的假阴性,因此不建议使用。
该方法使用刚果红琼脂,它由血琼脂作为基础,葡萄糖(10 g / l)和刚果红染料(0.4 g / l)组成。将要评估的菌株接种到培养基中,并在37°C下孵育24小时,然后在室温下孵育48小时。
如果观察到黑色的结晶菌落和干燥外观,则证明为阳性试验。
分光光度计的质量控制
为了评估吸光度或交易测量设备是否符合国际法规建立的光度参数,可以使用一种简单的技术来确定该设备是否在可接受范围内发出结果。
一种评估技术是基于等渗点使用刚果红。
等渗点是刚果红发出相同吸收度的波长,与pH,浓度和温度无关。吸光度值是固定的,可以用作参考。
已知刚果红的理论同构点为541 nm。如果获得的值不同,则已知设备存在波长漂移问题,需要由专业技术人员进行检查。
培养基的准备
Ortiz等人描述了一种用刚果红染料和羧甲基纤维素制备的称为CMC琼脂的培养基,以检测脂肪团的微生物菌株。也就是纤维素酶的生产者(内切葡萄糖苷,外切葡聚糖酶和ß-葡萄糖苷酶)。
该介质具有强烈的着色。内切葡聚糖酶会破坏羧甲基纤维素的结构,从而消散颜色。这表明是积极的反应。
粘度和吸光度的降低使酶活性得以定量。例如,在链霉菌种中。
微生物鉴定
刚果红对某些菌株的多糖结构具有亲和力,因此可以鉴定这些微生物。其中包括大肠杆菌和弗氏志贺氏菌。
刚果红琼脂平板也可用于获得特征性菌落,像Azospirillum sp的情况一样,它能产生猩红色的菌落。
细胞和组织染色
刚果红最常见的应用之一是其在淀粉样变性病诊断中的有用性。这种奇怪的疾病由各种器官中异常蛋白质的细胞外蓄积组成。这种异常蛋白质是在骨髓中产生的,称为淀粉样蛋白。
刚果红对该物质具有很高的亲和力。此属性已被用来显示其在组织学组织切片中的存在。为此,刚果红与苏木精/曙红结合使用。
淀粉样组织和刚果红的结合是通过羧基和氨基之间的非极性氢键发生的。淀粉样蛋白提供羧基(COOH),刚果红提供氨基。
在光学显微镜下观察时,淀粉样组织的颜色从粉红色到深红色不等。在具有双偏振光的显微镜中,可观察到这些制剂具有可辨认的苹果绿双折射性。
即,由于淀粉状纤维是各向异性的,所以它们呈现二色性。该观察结果证实了诊断。
用刚果红染色的组织与其他诊断方法(例如免疫细胞化学方法)兼容,甚至可以重新着色。
作为pH指示剂
抵制pH值变化的特性被称为色内窥镜检查的技术使用。
该技术使用的着色剂和pH指示剂可以检测某些病状。其中之一是使用刚果红,它可以显示出胃粘膜的早期癌灶,被用作酸度的标志。
该技术基于以下事实:在酸性pH值下刚果红为黑色。因此,将刚果红溶液放在胃粘膜上后,将选择苍白的区域进行活检,即不产生酸。这表明存在癌灶或壁细胞丢失。
参考文献
- “刚果红。” 维基百科,免费百科全书。2019年5月8日,12:13 UTC。2019年5月16日,04:08,es.wikipedia.org。
- Ortiz M,UribeD。基于纤维素-刚果红络合物定量内切葡聚糖酶活性的新方法。Orinoquia。2011年6月;15(1):7-15。可从以下网站获得:scielo.org。
- PeñaJ,UffoO。在古巴从牛乳腺炎中分离出金黄色葡萄球菌基因型生物膜的生产。Rev Salud动画。。2013年12月;35(3):189-196。网址:scielo.s
- Fich F,ChahuánM,FaríasM,CárdenasC,AbarzúaA,Araya G等。系统性淀粉样变性的皮肤表现为诊断关键:临床病例。牧师 智利。2012年4月;140(4):499-502。适用于:scielo。
- Duymovich C,Acheme R,Sesini S,MazziottaD。分光光度计和光度计实用更新指南。《生物学报》,2005年,第39期(9月至12月):可在以下网址访问:redalyc.org
- MarínJ,DíazJ和SolísJ.幽门螺杆菌感染的内窥镜检查:反应时间到了吗?Rev Esp Enferm Dig 2012;104(1):1-3
- Fieser L,Fieser M.1985。有机化学。编辑评论。西班牙巴塞罗那。可在以下网址找到:books.google.co.ve
- Murillo M.组织学染色技术。墨西哥瓜达拉哈拉大学。网址:academia.edu
- PailliéM.测定从三叶草(Trifolium repens)的根际土壤中分离的放线菌的纤维素分解,木质素分解和淀粉分解活性.2012。庞蒂维亚大学哈维里亚纳大学理学院工业微生物学波哥大DC可在以下网站访问:repository.javeriana.edu.co
- Cárdenas,D,Garrido M,Bonilla R,&Baldani V.在塞萨尔河谷的几内亚草(Panicum maximum Jacq。)上。牧场,2010年; 33(3):1-8适用于:scielo。