THAYER MARTIN AGAR：基础，制备和用途 - 生物学 - 2025

所述琼脂塞耶马丁它是脑膜炎奈瑟氏球菌和淋病奈瑟氏球菌的分离一种高营养的和固体选择性培养基; 均被称为致病性或临床上重要的奈瑟菌。

Thayer Martin琼脂的最重要的特殊特征之一是其高含量的营养补品。该特性是必不可少的，因为从营养的角度来看，奈瑟氏球菌对微生物的要求很高，因此不会在普通培养基中生长。

Thayer Martin /琼脂Thayer Martin商业媒体。源图像1：由作者MSc拍摄。Marielsa Gil，图像2。Pixinio.com菌落定殖，改良，Thayer，Martin，琼脂。

另一方面，由于这些微生物通常在非无菌区域发现，因此必须添加抑制剂以防止伴随的菌群生长，而不影响奈瑟氏球菌属的发育。

该琼脂由GC基础琼脂，血红蛋白，其他营养补品和抑制性物质（抗生素和抗真菌剂）组成。商业房屋分别出售每种补品。

在该培养基中播种的样品将取决于所寻找的微生物。对于淋病奈瑟菌，理想的标本是阴道和尿道分泌物。脑膜炎奈瑟氏菌最常用的样本是脑脊液，咽和鼻咽分泌物。

基础

奈瑟氏菌是分类为令人讨厌的微生物，因此很难分离。因此，塞耶·马丁（ThayerMartín）是一个复杂的媒介，其每个组成部分都履行以下功能：

GC基础琼脂

GC琼脂包含蛋白p，玉米淀粉，氯化钠，磷酸氢二钾，磷酸一钾和琼脂。它的成分为微生物的发育提供了基本的营养，中和了有毒的脂肪酸，有助于维持渗透平衡，确定pH值，并为培养基提供固体稠度。

血红蛋白

血红蛋白提供因子V和X（分别为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD和血红素）。因此，嗜血杆菌也可以在这种培养基中生长。血红蛋白可以脱水形式商购获得，或者可以将新鲜的去纤维蛋白牛血添加到培养基中。

补充营养

另一方面，还必须向Thayer-Martin培养基中添加一种增补剂，因为基础琼脂中所含的营养不足以满足奈瑟氏球菌属的需求。

最常用的浓缩补充剂称为isovitalex。它包含谷氨酰胺，腺嘌呤，NAD，共羧化酶，鸟嘌呤，硝酸铁，对氨基苯甲酸，维生素B12，硫胺素和葡萄糖。所有这些化合物对于正确发展致病性奈瑟氏菌都是必需的。

抑制剂类

由于它是一种营养丰富的培养基，因此必须使用抑制剂，以防止该地区常见菌群中微生物的生长，从而有利于分离奈瑟氏球菌。

抑制剂复合物由万古霉素，粘菌素和制霉菌素组成。万古霉素可抑制革兰氏阳性细菌的生长，粘菌素可抑制革兰氏阴性细菌（例如假单胞菌和腐生性奈瑟氏菌）的生长，制霉菌素可作用于酵母（例如白色念珠菌）。

但是，后来Thayer Martin Agar进行了修改。变化包括添加甲氧苄啶，增加琼脂的量和添加额外的葡萄糖。这些变化大大改善了淋病奈瑟氏球菌物种的恢复。

应当指出的是，甲氧苄啶抑制变形杆菌属的生长及其随之而来的蜂群形成。从这个意义上讲，正是抗生素为Thayer Martin培养基提供了选择性。

制备

原始Thayer Martin琼脂

-GC琼脂

称出8.2 g脱水的GC介质并悬浮在100 ml中。混合并煮沸1分钟，并经常搅拌使其完全溶解。将混合物在121℃的高压釜中灭菌15分钟。

-2％血红蛋白

将2 g脱水血红蛋白悬浮在2或3 ml热蒸馏水中，直到形成均匀的混合物。加一点点水以完成100毫升的体积。悬浮液在灭菌之前必须均匀。

在高压釜中灭菌15分钟。

-丰富的补充

用同一家商业公司提供的稀释剂重新配制商业瓶。拌匀 试剂盒中将指定稀释剂的用量。

-VCN抑制补充剂（万古霉素，大肠菌素，制霉菌素）

用商业公司提供的稀释液重新配制小瓶。拌匀 试剂盒中将指定稀释剂的用量。

-准备

对于每100毫升GC琼脂，请按照以下步骤操作：

将GC琼脂从高压釜中取出后，使其冷却至约50°C，并加入2 ml制备的血红蛋白溶液，2 ml的富集补剂（isobitalex或britalex）和2 ml的抑制补剂。混合并在无菌培养皿中食用。

让其固化并储存在冰箱中直至使用。

所制备培养基的颜色为樱桃红。培养基的最终pH值为7.2±0.2

改良的Thayer Martin琼脂

称出8.2 g脱水的GC介质并悬浮在100 ml中。加入1克琼脂和0.3克葡萄糖。混合并煮沸1分钟，并经常搅拌使其完全溶解。将混合物在121℃的高压釜中灭菌15分钟。

如前所述准备血红蛋白和富集补充剂。

使用的抑制补充剂是VCNT（万古霉素，大肠菌素，制霉菌素，甲氧苄啶）。

-准备

按照原始Thayer Martin琼脂的说明进行。

用

在对标本进行划线之前，应让Thayer Martin Agar加热。常用的样本是咽拭子，鼻拭子，阴道，尿道和/或直肠分泌物以及脑脊液。

使用新鲜样品，并在琼脂上强力接种。样品通过排料直接播种，然后用力划痕到表面。

将板在微需氧量罐（5％CO ₂）中在35-37℃下孵育24至48小时。在孵育时间结束时，检查板中的小，灰色，有时看起来呈粘液样的菌落。

对可疑菌落进行革兰氏和确认性生化测试。

质量检查

以下微生物菌株可用于Thayer Martin Agar的质量控制。

淋病奈瑟氏球菌ATCC 49226和脑膜炎奈瑟氏球菌ATCC 13090；两种菌株均有望获得令人满意的发展。

还应包括以下菌株：表皮葡萄球菌ATCC 14990，大肠杆菌ATCC 25922，奇异变形杆菌ATCC 43071和白色念珠菌ATCC10231。在所有这些菌株中，预期在该培养基中全部或部分抑制。

局限性

-我们必须牢记，对所用抑制剂有抗性的细菌会在培养基中生长。

-有些淋病奈瑟氏球菌菌株对使用的万古霉素浓度敏感。因此，建议使用补充了异维生素的但不含抑制剂的巧克力琼脂。

-有些耐制霉菌素的酵母菌株可以在这种培养基中生长，并干扰致病性奈瑟氏球菌，尤其是淋球菌的分离。

参考文献

1. Valtek诊断实验室。Thayer-Martin琼脂.2016。网址：com
2. 大不列颠实验室。Thayer Martin改良版。2010年可用：britanialab.com
3. 维基百科的贡献者。Thayer-Martin琼脂。维基百科，免费百科全书。2017年10月26日，16：33 UTC。可在以下网站获取：Wikipedia.org 4。于2019年2月28日访问。
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5. 实验室BBL™微生物精制培养基。1999。可在以下网站找到：bd.com
6. 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。