所述TCBS琼脂是高度选择性的和微分固体培养的手段，用于弧菌属，特别是霍乱弧菌，副溶血性弧菌和创伤弧菌，因为这种主要病原体细菌的分离和培养。
首字母缩略词TCBS代表柠檬酸硫代硫酸盐胆汁蔗糖。这种琼脂也被称为弧菌的选择性培养基。原始公式由Nakanishi创建，后来由Kobayashi修改。
商业霍乱弧菌接种的TCBS培养基和TCBS琼脂平板。资料来源：照片1：作者MSc拍摄。Marielsa Gil /照片2：Microrao，JJMMC，达avangere，印度卡纳塔克邦
它由酵母提取物，肉蛋白ept，三肽，柠檬酸钠，硫代硫酸钠，胆汁，蔗糖，氯化钠，柠檬酸铁，溴百里酚蓝，百里酚蓝和琼脂组成。
这种成分可以使水，食物和粪便样品中的弧菌充分发展。除霍乱弧菌外，它不在这种培养基上生长。此外，TCBS培养基能够抑制其他伴随细菌，特别是大肠菌的生长。
由于弧菌属某些物种产生了严重的胃肠道和肠外问题，因此对其诊断非常重要。人类主要是通过食用来自大海或污染水域的生食或未煮熟的食物而感染的，而且还会感染伤口。
因此，临床实验室在粪便液体样品的粪便培养研究中必须包括TCBS琼脂，尤其是在有米水的情况下。特别是如果患者报告已与海水接触或食用了贝类或鱼类。
基础
酵母提取物，肉蛋白ept和三肽是该培养基的营养来源。但是，TCBS琼脂对于大多数细菌而言都是不好的培养基。
通过添加柠檬酸钠和牛胆汁可实现高选择性。两者都是抑制剂，它们还向培养基提供碱性pH，从而限制了伴随菌群的生长并有利于霍乱弧菌的生长。应当指出，霍乱弧菌对酸度非常敏感。
就其本身而言，氯化钠渗透平衡培养基。此外，由于其浓度高，它也起抑制剂的作用，有利于嗜盐细菌的生长。
蔗糖是一种可发酵的糖，与溴百里酚蓝和百里酚蓝的pH指示剂一起赋予培养基不同的特性。因此，使用该培养基可以将蔗糖发酵菌株与非发酵菌株区分开。
蔗糖发酵菌株的菌落呈黄色，由于产酸，会将培养基从绿色变为黄色。非发酵罐半透明，培养基保持原始颜色（绿色）。
同样，该介质包含硫代硫酸钠作为硫源，柠檬酸铁作为显影剂。两者均显示能够产生硫化氢（无色气体）的细菌。H 2 S由硫代硫酸盐形成，随后与柠檬酸铁反应生成可见的黑色沉淀物。
最后，琼脂为培养基提供了坚实的一致性。
制备
称重89克脱水培养基，并溶于一升蒸馏水中。加热和频繁搅拌有助于溶解。混合物最多可煮沸2分钟。
该介质未高压灭菌。溶解后，将其直接放在无菌板上。当它们固化时，它们以倒置的方式排列在血小板上，并储存在冰箱（2-8°C）中直至使用。
制备后的培养基必须保持pH 8.6±0.2。
脱水介质的颜色为浅米色或浅米色，介质的颜色为林绿色或蓝绿色。
重要的是，在播种样品之前让板预热。
用
隔离弧菌的最常见标本是腹泻大便。
如果不能立即将粪便样品接种到选择性培养基上，应将其运送到Cary Blair培养基上。
为了增加培养物的敏感性，可以将粪便作为富集培养基通过pH 8.4的蛋白ept水，最多培养8小时，然后将其继代培养至TCBS培养基中。
还必须考虑到某些弧菌菌株会在免疫抑制的患者中引起败血症，因此可以从血液培养物中分离出来。同样，当霍乱疫情爆发时，可以分析海洋中的水和食物样本。
播种
研究样品的接种物必须突出，通过筋疲力尽的分层方法进行播种。将平板在需氧条件下于37°C孵育24小时。
推测的霍乱弧菌菌落中等大小，光滑，不透明，边界较细，由于蔗糖发酵而呈黄色。
溶藻弧菌，河流弧菌，哈雷弧菌，cincinnatiensis弧菌，弗氏弧菌，灭蚊弧菌和一些创伤弧菌的种类以相似的方式生长。其他临床上重要的弧菌，如副溶血弧菌，不会发酵蔗糖，而是发展为橄榄绿色菌落。
TCBS琼脂平板接种副溶血弧菌。资料来源：isis325 Flickr
另一方面，必须牢记，某些氧化酶（+）的气单胞菌和褶膜单胞菌菌株可以在这种培养基中生长，形成黄色菌落，可能使临床医生感到困惑。虽然某些假单胞菌菌株还氧化酶（+）以绿色菌落的形式生长，如副溶血弧菌。
局限性
切勿从TCBS琼脂获得的菌落中进行弧菌属阳性的氧化酶检测，因为所得结果将是假阴性。中间的化合物强烈干扰该测试。因此，它必须由血琼脂上的亚培养物制成。
质量检查
为了证明培养基状况良好，建议播种已知或经过认证的对照菌株，并观察其生长是否符合预期的特性。
为此，您可以使用以下应变：
-霍乱弧菌-生长令人满意（黄色菌落，半透明边界）。
-副溶血弧菌-生长令人满意（带有绿色中心和半透明边界的菌落）。
-溶藻弧菌ATCC 17749-令人满意的生长（黄色菌落，菌落周围有相同颜色的光环）。
-粪肠球菌ATCC 29212-全部或部分抑制（黄色或半透明小菌落）。
-铜绿假单胞菌ATCC 27853- –部分或全部抑制（蓝色菌落）。
-大肠杆菌ATCC 25922-完全被抑制。
-Proteus mirabilis ATCC 43071--完全或部分抑制。（小殖民地绿色中心半透明边框）。
未接种培养基的孵育应保持不变。
参考文献
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