的铋亚硫酸盐琼脂是固体介质的选择性和差动培养,特别配制用于肠道沙门氏菌亚种血清型肠伤寒隔离,其他物种的沙门氏菌中。该介质的简称为BSA琼脂,其英文缩写为Bistuth Sulfite Agar。
亚硫酸铋琼脂的原始配方是由威尔逊和布莱尔(葡萄糖亚硫酸盐铁介质)于1927年创建的;它包含亚硫酸钠,葡萄糖,铋溶液,柠檬酸铵,硫酸亚铁和琼脂。
在亚硫酸铋琼脂上培养沙门氏菌48小时的生长。资料来源:Pixnio.com作者:USCDCP WR Erving博士
今天,对原始培养基进行了修改,包括肉提取物,肉和酪蛋白p,亚硫酸铋指示剂,葡萄糖,磷酸二钠,硫酸亚铁,鲜绿色和琼脂。
有许多分离沙门氏菌的方法,但是当要恢复鼠伤寒血清型时,亚硫酸铋琼脂相对于它们具有显着的优势,因为在大多数情况下,这种微生物的回收率非常低甚至没有。 。
但是,在尝试分离肠病原时,有必要使用一种以上的培养基,因为亚硫酸铋琼脂对沙门氏菌的其他种类和志贺氏菌属的抑制或发展都较差。在这个琼脂中。
应当指出的是,在所有沙门氏菌物种中,鼠伤寒血清型是人类最重要的肠病原体之一,这是它的唯一贮藏库。该血清型引起伤寒,肠胃炎,菌血症和败血病。
因此,在分析怀疑存在水,粪便或食物样品时,应将这种琼脂包括在内。
基础
像大多数培养基一样,亚硫酸铋琼脂含有诸如蛋白ept和肉提取物等促进细菌生长的营养物质。同样,葡萄糖用作能量和碳的来源。
但是,并非所有细菌都会在该培养基上生长,因为亚硫酸铋琼脂是一种选择性培养基。它包含抑制革兰氏阳性微生物和某些革兰氏阴性细菌生长的化合物。这些化合物是:指示剂亚硫酸铋和亮绿色。
就其本身而言,磷酸二钠可保持培养基的渗透压和pH值。
此外,亚硫酸铋琼脂是差分介质由于硫酸亚铁,其示出了H的形成的存在2 S.为H 2 S按用硫酸亚铁和形成清晰可见不溶的黑色沉淀细菌发生反应而形成。
最后,琼脂为培养基提供了固体稠度。
制备
称出52.3 g脱水培养基,并溶于一升水中。经常搅拌加热混合物至沸腾1分钟,直到完全溶解。不要过热。该培养基不可高压灭菌,因为极高的热量会损坏培养基。
冷却至45°C并摇晃,然后放入无菌培养皿中。建议制作具有良好厚度的印版。为此,必须将25 ml倒入每个板中。让它凝固。由于它是未经灭菌的介质,因此建议立即使用是正常的。
但是,D'aoust于1977年进行的一项研究表明,随着亚硫酸铋琼脂培养基的成熟,鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的回收率会更高,而不会影响Typhi和Paratyphi B的表现。
D'aoust建议在冷藏的第4天使用平板,尽管他指出,随着培养基年龄的增长,选择性降低,寻常变形杆菌的菌株更容易生长。
因此,对于粪便等高度污染的样品,最好使用新鲜制备的培养基。否则在准备的第4天使用。其他作者建议在准备好后的第二天使用板,将其保存在冰箱中。
冷冻的板在使用前必须回火。培养基的pH值应为7.5±0.2。原始介质为米色,制备的介质为绿灰色乳白色。
应用领域
可在这种培养基中种植的样品包括粪便,饮用水或废水和食物。
为了改善分离物,建议在用亚硫酸铋琼脂接种之前,先用乳糖肉汤进行预富集处理,再用四硫酸盐肉汤或胱氨酸亚硒酸盐肉汤进行富集。
将板在需氧条件下于35°C±0.2下孵育24至48小时。
亚硫酸铋琼脂的菌落特征
通常在24小时内在此琼脂上看到鼠伤寒沙门氏菌菌落,中心呈黑色,周围被鲜绿色的光环包围。而在48小时内,由于硫化氢的形成,它们会完全变黑。
-该培养基抑制志贺氏菌属的大多数物种。
-伤寒沙门氏菌和亚利桑那链球菌可以产生非常相似的菌落。
-产生H 2 S的大肠菌如变形杆菌和柠檬酸杆菌会产生类似于沙门氏菌的菌落,因此有必要进行生化鉴定测试。
-必须进行良好的分离以获得孤立的菌落;这是观察沙门氏菌属菌落典型特征的唯一方法。
质量检查
为了进行无菌控制,将未接种的板在37°C下孵育,预计不会出现生长或颜色变化。
为了进行质量控制,已知的菌株如:
大肠杆菌ATCC 25922,肠炎沙门氏菌ATCC 13076,伤寒沙门氏菌ATCC 19430,弗氏志贺氏菌ATCC 12022,粪肠球菌ATCC 29212。
预计大肠杆菌和弗氏志贺氏菌分别被发展成棕绿色和棕色菌落部分抑制。鉴于这两个沙门氏菌必须具有黑色菌落并具有金属光泽,因此必须具有良好的发育,最后必须完全抑制粪肠球菌。
参考文献
- 威尔逊W。,&EM McV。布莱尔 葡萄糖亚硫酸铋铁介质用于分离伤寒芽孢杆菌和变形杆菌的用途。卫生杂志,1927年;26(4),374-391。取自.jstor.org
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