马铃薯葡萄糖琼脂：原理，制备和使用 - 生物学 - 2025

的葡萄糖琼脂马铃薯是一种媒介，固体的非 - 选择性的营养培养。细菌和真菌种类可以在其中生长，但特别指出其用途是用于分离丝状真菌和酵母菌。它也被称为PDA介质，用于英语表达“马铃薯葡萄糖琼脂”。

它对于分离植物病原性真菌（即那些影响植物的真菌）特别有用。为了从受感染的蔬菜中播种样品，可以使用其他方式，例如Sabouraud琼脂或麦芽琼脂，但是对于常规使用，由于获得更大的孢子形成，马铃薯葡萄糖琼脂是优选的。

黑曲霉和Sinemas分别在马铃薯葡萄糖琼脂上。资料来源：英语维基百科/ Joselrojas的Alextrevelian 006

它也用于计数化妆品，药​​品和某些乳制品样品中的真菌菌落。同样，它也适合播种皮肤刮屑样品以寻找皮肤癣菌，而皮肤癣菌在这种培养基中生长非常好，从而发展出其特征性色素。

马铃薯葡萄糖培养基是在实验室中制备的非常简单容易的培养基。顾名思义，它包含了马铃薯，葡萄糖和琼脂的浸泡液。另外，可以加入抑制性物质以防止细菌生长并增加对真菌物种的选择性。

基础

马铃薯葡萄糖琼脂是一种培养基，可提供丝状真菌和酵母菌发育所必需的营养元素。

马铃薯与葡萄糖的注入相结合，为真菌的令人满意的生长提供了理想的能源。琼脂是提供培养基一致性的一种。

单独的培养基不会抑制细菌的生长，因此它是非选择性培养基。为了使其具有选择性，需要添加抑制物质，例如酒石酸或抗生素。

制备

-马铃薯葡萄糖琼脂的自制（非商业性）制备

培养皿

准备如下：

首先，土豆洗得很好，除去了土壤。将它们切成薄片，切碎所有东西和外壳。称重200克土豆，并在一升蒸馏水中煮半小时。

最后，用粗棉布过滤或过滤所有制剂。

用最多一升的蒸馏水完成所获得的液体。向输液中加入20克琼脂和20克葡萄糖，充分混合并在121摄氏度，15磅压力下高压灭菌15分钟。

冷却至50°C，并在无菌培养皿中食用。将准备好的板保存在冰箱中。

楔子

也可以制备马铃薯葡萄糖琼脂楔块。

在这种情况下，在高压灭菌器中灭菌之前，将12至15毫升的培养基放入试管中，然后对其进行高压灭菌，并在放置时置于特殊的支撑物上直至其固化。存放在冰箱中。

培养基的pH值保持在5.6±0.2，但是，一些实验室添加10％酒石酸将pH值降低到3.1±0.1，以抑制细菌的生长。

从同样的意义上讲，其他实验室更喜欢添加抗生素以使其对真菌的培养具有选择性，并防止细菌生长。

-马铃薯葡萄糖琼脂的商业制备

称量39克市售的脱水介质，并溶于一升蒸馏水中。静置5分钟。

频繁搅拌加热混合物直至完全溶解。随后，将其在121℃的高压釜中灭菌15分钟。

可以准备板或楔子。如上所述进行。

pH值保持在5.6±0.2。如果需要将pH设置为3.1，则在加入板之前应添加14 ml无菌20％酒石酸。

原始介质为米色，制备的介质为浅琥珀色，外观略带混浊或乳白色。

应用领域

在马铃薯葡萄糖琼脂上播种植物样品的方法

-对于染色的叶子

叶子被切成碎片。

在装有50％酒精的50 cc玻璃杯中，放置树叶（染色和健康的碎片），以消毒表面20到30秒。扔掉酒精，如果它们是薄叶，则添加20％的次氯酸钠40至50秒，如果树皮和原木则增加时间至80秒。

丢弃次氯酸钠，并用无菌镊子将消毒后的碎片放在培养基表面（最多10片）上。设定日期并在20-30°C下孵育。

-水果和块茎

如果水果是肉质的，请打开受真菌感染的水果，并用无菌手术刀从患病部位和健康部位取出碎片，并将其放在琼脂表面。

如果水果是柑橘类水果，例如柠檬或橙子，则必须将其打开并播种种子。

当水果的表面受到影响并观察到孢子时，理想的方法是在板上使用光栅法。这包括用灭菌和冷却的“ L”形抹刀接触孢子，然后在琼脂上锯齿形播种2至3次。

-对于谷物

如叶子所述对它们进行消毒，然后放在琼脂上。

-对于树枝和茎

刮下树皮，然后取出健康和患病部位的碎片，直接播种在琼脂上。

将接种的平板在20-30℃下需氧培养72小时。

在马铃薯葡萄糖琼脂上播种皮肤，头发或指甲鳞片样品的方法

采样应使用11号手术刀刀片进行，以修剪受影响的头发，皮肤鳞片或指甲以寻找皮肤真菌。取样之前，应使用70％的酒精对区域进行消毒。

-皮肤样本

在鳞状病变中，应刮擦病变的边缘，因为很可能会在那里发现真菌。

在渗出性病变中，用干或湿拭子取样。立即播种在马铃薯葡萄糖琼脂或Sabouraud琼脂上。避免运输工具。

另一种采样方法是通过Mariat和Adan Campos的方块地毯技术。在这种情况下，用一块无菌羊毛将患处擦拭5次以进行后续培养。

样品可以直接放入培养基中。

-头发样本

根据病理情况，可以切除或拔除患处。将样品放在培养基中。

-指甲样本

受影响的指甲的特定部位可以刮擦或切割。这将取决于伤害的类型。

播种前将样品切成1毫米的块，以增加真菌与培养基接触的可能性。

鉴定程序

将板中获得的菌落分离在装有马铃薯葡萄糖琼脂的试管中，以进行菌落的宏观研究（外观，颜色，稠度，发育程度）。

显微镜研究（观察结构及其形成）可以通过显微培养或在显微镜和载玻片之间的显微镜下直接观察来进行。

菌落数

该培养基还可以用于确定植物，食品，化妆品或药物样品中存在的真菌和酵母菌含量。为此，使用了补充了抗生素的马铃薯葡萄糖琼脂，例如：（氯霉素，氯四环素或两者）。

将1 ml样品-最好稀释后-倒入无菌的空培养皿中，然后融化马铃薯葡萄糖琼脂塞，冷却至45°C。倒入培养皿中，旋转直至均匀。静置直至固化。

根据所需的真菌类型和样品类型，在20-25°C（霉菌）或30-32°C（酵母）中需氧孵育5至7天或更长时间。可以使用两个平板在两个温度范围内孵育。

食物样品中真菌菌落的计数。马铃薯葡萄糖琼脂补充抗生素。资料来源：Pxhere.com照片/ 777267

维持真菌菌株

马铃薯葡萄糖琼脂可用于维持可行的真菌菌株数年。

为此，真菌在马铃薯葡萄糖琼脂的楔形上生长，一旦真菌生长，就用矿物油覆盖。该油应在高压釜中灭菌45分钟，粘度应约为300至330 Saybolt。油应位于斜角尖端上方1至2厘米处。

质量检查

从准备的每个批次中，取1或2个板，在25°C下孵育48小时或在20°C下孵育96小时。良好的无菌控制是未观察到菌落发育的控制。

也可以使用已知或认证的控制菌株，例如：

酿酒酵母ATCC 9763，白色念珠菌ATCC 10231，巴西曲霉ATCC 16404，薄荷毛癣菌ATCC9533。在所有情况下均预期生长良好。

参考文献

1. 大不列颠实验室。葡萄糖琼脂土豆。2015.可用在：britanialab.com
2. Neogen实验室。马铃薯葡萄糖琼脂。可在以下网站获得：foodsafety.neogen.com
3. Insumolab实验室。马铃薯葡萄糖琼脂。可用在：insumolab.cl
4. 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。
5. Casas-RincónG.一般真菌学。1994.委内瑞拉中央大学第二版，图书馆版。委内瑞拉加拉加斯。
6. Aceituno M.根据参考方法Pharmacopea Usp 2005对国家生产实验室的密粉型眼影中的微生物质量进行评估。危地马拉圣卡洛斯大学。
7. CuétaraM.表面样品的处理。伊比利亚美洲真菌学杂志。2007; pp。1-12