在营养琼脂是一种非选择性培养基和无差分固体培养。从营养的角度来看,各种不需要的细菌都可以在这种培养基中生长。
它是一种简单的培养基,尽管有其名称,但与其他类似培养基(如脑心脏浸液琼脂或胰酶大豆大豆琼脂)相比,其营养价值较低。
营养琼脂的菌落计数
它在实验室中的用途非常广泛。它主要用于传代物种,维持菌株,计数菌落,作为制备血琼脂的基础。
同样,由于其浅米色,可以区分一些细菌菌株产生的色素,例如铜绿假单胞菌的绿色色素,粘质沙雷氏菌在室温下产生的砖红色色素,葡萄球菌的金黄色色素。金黄色葡萄球等。
此外,它是市场上最便宜的增长媒介之一。
基础
如上所述,它是一种非常简单的培养基,它依赖于为细菌生长提供营养而没有限制,也没有复杂的解释过程。
由于培养基是半透明的,因此非常适合通过深度播种方法对菌落进行计数。
组成
它主要由肉提取物或酵母提取物,蛋白s或明胶胰消化物,琼脂,琼脂,氯化钠和蒸馏水组成。
肉或酵母提取物和蛋白ept代表了碳和矿物质(氮,磷和硫)的重要来源,细菌会将其用作能量和生长因子的来源。
同样,琼脂是所有固体培养基的基础,即将取代明胶,而明胶是罗伯特·科赫(Robert Koch)使用的第一种基础化合物,可使其培养基具有牢固的一致性。
琼脂是由半乳糖,半乳甘露聚糖,琼脂糖和琼脂果胶组成的多糖。凝固温度为40°C,融化温度接近100°C。
就其本身而言,氯化钠为培养基提供了细菌发育所必需的渗透压。
最后,水用于水合和溶解冻干的化合物。应使用调节至中性pH的蒸馏水。自来水不宜使用,因为它含有钙和镁,可以与培养基中的磷酸盐反应并形成不溶性盐。
制备
对于一升营养琼脂,必须称重31克脱水培养基。将其放在烧瓶中,并溶于一升蒸馏水中。静置5分钟后,在热源上加热并持续搅拌直至沸腾1或2分钟。
制备培养基。
然后将烧瓶置于高压釜中,并在121℃下灭菌20分钟。
高压灭菌器
最后,将其从高压釜中取出,并使用层流罩或本生灯在无菌培养皿中盛装。
如果培养皿是一次性的(塑料),则琼脂温度约为50°C时必须分配培养基,以防止其因过热而变形。
使其固化并储存在倒置的板架上,并在2-8°C冷藏直至使用。
播种前必须对板进行调质。如果营养琼脂平板被污染或脱水,则不应使用。
准备好的培养基的pH值必须调节到7.3±0.2。
应用领域
它是微生物实验室中使用的最简单的培养基。它的配方非常适合不需要细菌的生长。
其主要用途如下:
作为制备血琼脂的基础
这种培养基有时被用作制备血琼脂的基础,但是它不是最常用的基础。
刺激孢子形成细菌的孢子形成
该培养基对于刺激诸如芽孢杆菌属的芽孢形成细菌的芽孢形成特别有用。
为此,播种芽孢杆菌属菌株并在需氧条件下于37°C孵育24小时。一旦菌落生长,便使板经受温度应力,即,将烤箱的温度升至44°C,再放置24小时或放在冰箱中放置24小时。
最后,对培养物进行涂片,并用革兰氏染色或Shaeffer-Fulton孢子染色进行染色。在它们中,将观察到带有内生孢子(细菌内部的孢子)和外孢子(细菌外部的孢子)的细菌。
应变维护
一些研究或大学的教学支持实验室要求尽可能长地保持具有临床重要性的活细菌,以便将细菌库(bacterioteca)用于研究工作或用于教学实践的准备。学生将学习操纵和识别这些微生物。
营养琼脂以及脑心浸液琼脂均可用于此目的。制备琼脂,将其倒入带有胶木盖子的试管中,并在底座上倾斜,以使琼脂固化,在底部形成块状,在表面形成斜面(长笛喙)。
每个试管上都标有要播种的细菌的名称和日期。每种细菌都将被接种到斜面上并孵育24小时,一旦菌落生长,将试管在室温下保存。
细菌必须更新1至3个月,以避免培养基的污染和脱水以及细菌的死亡。
这样,只能保持非挑剔的细菌。
菌落数
尽管有专门的菌落计数方法,例如标准计数琼脂,但营养琼脂可用于此目的,可通过用drigalski刮刀进行表面播种或按深度进行。因此,它在食品和水的微生物分析中非常有用。
运行诊断测试
因为它是不包含血液或任何其他添加剂的培养基,所以理想的是使在该培养基上生长的菌落进行过氧化氢酶测试。
同样,由于其颜色浅,表明可以直接在接种的琼脂区域进行氧化酶测试,而不会受到干扰。
从休闲盐水(海滩)中恢复嗜温需氧菌
用10%海水制备的营养琼脂可用于评估海滩水中的嗜温需氧菌。
以这种方式,可以理解水对这些微生物的实际污染水平,因为在这种类型的样品中,当使用以常规方式制备的培养基时,结果是重叠的。
Cortez等人证明了这一点。在2013年从事一项研究工作。
这可以解释为由于细菌从高盐环境变为低盐环境时细菌会发生突然变化,因此微生物进入嗜睡状态,在这种状态下它们是可生存的,但不可培养。
参考文献
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