MACCONKEY琼脂：原理，制备方法和用途 - 生物学 - 2025

在MacConkey琼脂是允许革兰氏阴性细菌的独家隔离的固体培养基。因此，它是一种选择性培养基，还可以区分乳糖发酵菌和非发酵菌，这使其成为差异培养基。它是微生物实验室中使用最广泛的培养基之一。

该培养基主要用于分离属于肠杆菌科的革兰氏阴性杆菌，包括机会病原和肠道致病菌。

麦康凯琼脂播种有两种细菌。左侧是乳糖发酵菌落，右侧是非乳糖发酵菌落。

它也可用于分离生活在胃肠道中但不属于肠杆菌科的其他肠杆菌，例如气单胞菌属，Plesiomonas属等。

最后，它可以分离在环境，水或土壤中发现的其他非葡萄糖发酵革兰氏阴性杆菌，但有时可能是机会性病原体，例如假单胞菌属，不动杆菌属，产碱菌属，紫罗兰杆菌，嗜麦芽嗜单胞菌等。

基础

麦康凯琼脂

这种介质的基础可以通过对其组成的描述来解释，因为每种介质都有确定其属性的目的。

胆汁盐和结晶紫

从这个意义上讲，MacConkey琼脂具有复杂的成分。首先，它含有胆盐和结晶紫。

这些元素负责抑制革兰氏阳性细菌和一些挑剔的革兰氏阴性细菌的生长。反过来，它有利于发展不受这些物质影响的革兰氏阴性杆菌。因此，它是一种选择性的介质。

据说与其他也抑制革兰氏阳性细菌和大多数革兰氏阴性细菌生长的培养基相比，选择性稍高。

蛋白ept，聚果胶和乳糖

它包含为这种环境中发育的微生物提供必要营养的物质，例如蛋白p，聚果胶和乳糖。

乳糖是培养基成为差异培养基的关键，因为具有发酵乳糖能力的微生物会形成强烈的粉红色菌落。

一些细菌可以缓慢或弱发酵乳糖，形成淡粉红色菌落并保持乳糖阳性。

那些不发酵乳糖的人使用蛋白one作为能源，产生氨，碱化培养基。因此，起源的菌落是无色或透明的。

PH指示

颜色变化是通过MacConkey琼脂具有的另一种基本化合物来实现的。该化合物是pH指示剂，在这种情况下为中性红色。

乳糖发酵产生混合酸。它们将培养基酸化至​​低于6.8的pH。

这会使pH指示剂变成深粉红色。颜色的强度可以根据最终的pH值而变化。

蒸馏水，氯化钠和琼脂

另一方面，它包含蒸馏水和氯化钠，可提供中等水合作用和渗透压平衡。最后，培养基中含有琼脂，琼脂是提供固体培养基稠度的基础。

制备的MacConkey琼脂培养基的最终pH值应调整为7.1±0.2。

制备

对于一升MacConkey琼脂，必须称量50克脱水培养基，然后放入烧瓶中，并溶于一升蒸馏水中。静置10分钟后，将其加热，持续搅拌直至沸腾1分钟。

然后将烧瓶置于高压釜中，并在121℃下灭菌20分钟。最后，将其从高压釜中取出，冷却至45°C，然后在层流罩或本生灯前面的无菌培养皿中使用。

使其固化并储存在倒置的板架中，并在2-8°C的冰箱中冷藏直至使用。

为了获得抑制变形杆菌属产生的变色作用的MacConkey琼脂，使用了低盐的MacConkey琼脂。

常规MacConkey琼脂的用途

MacConkey Agar包含在所有用于播散实验室中接收的临床样品的培养基中。它还可用于食品微生物学和环境微生物学。

在这种培养基中生长的各种革兰氏阴性棒表现出表型特征，有助于对所涉物种进行推测性诊断。例如，菌落的大小，颜色，稠度和气味是可以指导的一些特征。

在这种培养基中，大肠杆菌，克雷伯菌属和肠杆菌属菌种会产生强烈的粉红色菌落，周围是沉淀的胆汁区域。

而细菌，如柠檬酸杆菌，普罗维登西亚菌，沙雷氏菌和Hafnia菌则在24小时后会显得无色，而在24 -48小时后会呈现淡粉红色。

同样，变形杆菌属，埃德瓦德氏菌属，沙门氏菌属和志贺氏菌属产生无色或透明菌落。

MacConkey琼脂的其他变体

MacConkey Agar还有其他具有特定用途的变体。它们在下面提到：

麦康凯琼脂和山梨糖醇

设计此培养基的目的是区分肠致病性菌株（肠出血性大肠杆菌O157：H7）与其余的大肠杆菌菌株。

该介质将碳水化合物乳糖交换为山梨糖醇。肠出血性大肠杆菌O157：H7菌株与其余菌株不同，因为它们不发酵山梨糖醇，因此获得了透明菌落，而其余大肠杆菌菌株则发酵山梨糖醇，菌落呈粉红色。

不含结晶紫或盐的MacConkey琼脂

这种琼脂与经典的MacConkey琼脂有很大的不同，因为它没有紫罗兰色晶体，革兰氏阳性细菌可以生长。

另一方面，盐的缺乏抑制了由某些肠杆菌（例如变形杆菌属的那些）产生的琼脂上出现群聚的现象，因此有助于分离存在的所有细菌，包括革兰氏阳性细菌。

麦康凯琼脂与头孢哌酮

MacConkey琼脂的这种变体最初用于分离香港红杆菌，后来被发现可用于分离Butzleri芽孢杆菌。两者均为抗头孢哌酮的轻微弯曲的革兰氏阴性棒。

这些细菌最近与导致胃肠炎和亚洲和欧洲人的腹泻有关，它们是两种强大的新兴病原体。

抗生素可以抑制胃肠道伴随的菌群，从而有利于这些细菌的生长，防止它们被忽视，因为它们需要72小时才能生长。

用10％v / v的海水配制的MacConkey琼脂

该变体可用于评估粪便污染的细菌卫生指标，包括休闲咸水（海滩和海湾）中的总大肠菌群和粪便大肠菌群。

Cortez等人在2013年证明，与使用蒸馏水制得的MacConkey琼脂相比，以这种方式制得的培养基可在盐环境中显着提高这些微生物的回收率。

这是由于以下事实：经修饰的培养基刺激处于潜伏状态的细菌的生长，该潜伏期处于“可存活但不可培养”的潜伏状态，因此它们无法在常规培养基中回收。

参考文献

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