所述M-H培养基没有选择性，固体营养培养基由肉浸液，蛋白胨酸酪蛋白，淀粉的，琼脂和蒸馏水。这种培养基可使大多数快速生长的细菌实现出色的微生物生长。
它最初是由约翰·霍华德·穆勒（John HowardMüeller）和简·欣顿（Jane Hinton）创建的，用于分离需要营养的细菌，例如淋病奈瑟氏球菌和脑膜炎奈瑟氏球菌。但是，由于其特性，它被证明是研究抗生素敏感性的理想选择，可提供可靠且可重复的结果。
抗菌素（米勒·欣顿琼脂）。资料来源：en.wikipedia的Graham Beards博士
因此，MüellerHinton琼脂是临床和实验室标准协会（CLSI）和欧洲抗菌药物敏感性测试委员会认可的培养基，用于通过Kirby圆盘扩散法和鲍尔
基础
作为一种非选择性营养培养基，它对大多数病原菌的生长均极佳。
另一方面，其简单的组成使得物质易于在其上扩散，这是通过圆盘扩散法进行磁化率测试的基本特征。
它的另一个特点是它含有少量的抑制剂，可以有效地评估磺酰胺，甲氧苄啶和四环素。
但是，应该记住，该介质必须满足某些条件以确保其正常运行，包括：
调节pH，琼脂深度和胸腺嘧啶，胸苷，Ca ++，Mg ++和Zn ++的适当浓度。
您还必须知道该方法是标准化的，因此必须满足所有参数，例如：
接种物的浓度，抗生素圆盘的浓度和保存，在琼脂上放置适当数量的圆盘，一个圆盘与另一个圆盘之间的距离，某些抗生素的策略性放置，大气，温度和时间孵化。
制备
称重37克脱水的MüellerHinton培养基，并溶于1升蒸馏水中。在搅拌的同时加热培养基以帮助溶解。煮1分钟。
高压灭菌器在121°C消毒15分钟。从高压釜中取出时，应将烧瓶放在50°C的水浴中冷却。将25到30毫升倒入直径10厘米的无菌培养皿中。
板的平均厚度应为4毫米（理想），允许范围为3-5毫米。
如果需要使用MüellerHinton琼脂作为基础制备血琼脂，则在上板之前先倒入5％无菌和去纤维化的羊血。
培养基的最终pH应在7.2至7.4之间。
投资并存放在冰箱中，直到使用。使用前，让板达到室温。
所制备培养基的颜色为浅米色。
应用领域
它用于对大多数快速生长的非有害病原体进行抗菌素或抗生素药敏试验。
如果在琼脂中添加血液，则可用于进行某些微生物的抗菌素检测，例如：肺炎链球菌，嗜血杆菌，脑膜炎奈瑟氏球菌等。它也已被用于分离嗜肺军团菌。
抗菌技术
在进行抗菌谱检查之前，必须准备相当于1.5 x 10 8个细胞的细菌溶液。
为此，取3至4个纯菌落，并将其悬浮在大豆胰蛋白bro肉汤或MüellerHinton肉汤中，孵育2至6小时，并用无菌盐溶液调节浓度，将其与Mac Farland标准0.5％。
如果他们需要微生物，可以将菌落直接悬浮至浓度为Mac Farland的0.5％。随后，在MüellerHinton平板上接种浸有准备好的细菌溶液的药签。
为此，将药签浸入溶液中，然后通过压在管壁上去除多余的液体。之后，立即将棉签穿过整个表面，不留任何接触的地方，然后将板轻轻旋转，然后再次播种。将该操作再重复2次。
静置10分钟，然后用无菌镊子插入抗生素光盘，它们之间留有24毫米的间隙。将每个圆盘放在琼脂上后，用镊子轻轻按压每个圆盘，以确保它们牢固粘附。
一旦完成该过程，将板倒置并在需氧条件下于35-37°C孵育16至18小时。如果它是一种苛刻的微生物，则可能值得微需氧症，并且如果抗菌素图包含奥沙西林片，则应在24小时后读取。
标尺用于测量每个光环的直径。结果应以毫米记录。随后，将获得的值与当前CLSI手册发布的截止点表相关联。
抑制晕圈的测量。资料来源：USCDCP，Pixnio.com
根据具体情况，以敏感（S），中间（I）或耐药（R）报告。
根据分离出的微生物及其产生的感染类型选择抗生素。
有时必须牢记策略性放置抗生素以揭示耐药性的表型模式。
在MüellerHinton琼脂上战略性放置碟片
对于肠杆菌，应将克拉维酸片置于第三代和第四代头孢菌素上。蛋形变宽表明该菌株是广谱β-内酰胺酶（ESBL）的产生者。这意味着患者不应接受任何头孢菌素治疗。
在大肠杆菌菌株中产生广谱β-内酰胺酶（ESBL）的表型表达。资料来源：作者MSc摄。玛莉莎·吉尔（Marielsa gil）
在葡萄球菌中，重要的是将红霉素或阿奇霉素碟片放在克林霉素碟片之前（D检验）。
红霉素的抗性晕环和克林霉素的晕环变平表明该菌株具有菌株诱导的克林霉素抗性（ICR）。这意味着克林霉素治疗将无效。
为了在肠杆菌科细菌和一些非发酵革兰氏阴性棒中寻找诱导型AMP C菌株，将他唑巴坦头孢他啶，头孢西丁或哌拉西林圆盘与亚胺培南圆盘相距27 mm。
面向亚胺培南的磁盘之一中的光晕变平表明存在诱导型AMP C.
为了寻找组成型C-AMP，一个500 µg氯西林盘面对着头孢他啶（30 µg）和头孢噻肟（30 µg），相距25 mm。任何头孢菌素中的晕圈变宽表明阳性。
也可以用9mm的Whatman No.6滤纸圆盘代替氯沙西林圆盘，该滤纸浸渍有18 mm的苯硼酸（400 µg）。它的解释与前一个解释相同。
最后，为了研究金属β-内酰胺酶的生产，尤其是在铜绿假单胞菌中的生产，我们使用了一个装有10 µl乙二胺四乙酸（EDTA 750 µg）和巯基乙酸（SMA 300 µg）的圆盘，该圆盘面临亚胺培南和美罗培南圆盘，在15毫米的距离。
如果亚胺培南或美洛培南晕晕向EDTA / SMA盘增宽，则该试验为阳性。必须通过修改后的Hodge检验来确认该结果。
该方法包括在MüellerHinton平板上接种大肠杆菌ATCC 25922菌株。亚胺培南圆盘放置在平板的中央，然后从圆盘到怀疑的铜绿假单胞菌菌株从边缘形成条纹。每个平板最多可以测试4个菌株。
如果在妊娠纹周围有亚胺培南晕圈变形的区域，则测试为阳性。
错误结果的原因
-保存不当的抗生素光盘会产生错误的耐药性。例如，奥沙西林片极易受温度变化的影响。
-低于指示值（酸性）的培养基的pH在氨基糖苷和大环内酯类药物中产生较小的光晕（错误抵抗力的风险），在青霉素，四环素和新霉素中产生较大的光晕（错误敏感性的风险）。
-如果pH值高于指示值（碱性），则上述效果会相反。
-高胸腺嘧啶和胸腺嘧啶核苷浓度的介质会通过显着降低磺酰胺和甲氧苄啶的抑制晕圈而产生影响。
-高浓度的钙和镁会导致氨基糖苷类，多粘菌素B和四环素类药物对铜绿假单胞菌产生抗药性。
-低浓度的钙和镁对铜绿假单胞菌菌株产生氨基糖苷类，多粘菌素B和四环素类药物的假敏感性。
-锌的存在会影响碳青霉烯片（亚胺培南，美罗培南和厄他培南）的结果。
-3mm以下的介质厚度会产生错误的灵敏度结果，而5层以上的厚度会产生错误的电阻值。
-由于抗生素立即排出，因此在抗菌素图中移动椎间盘会产生晕圈。
-极弱的接种物会影响结果，因为琼脂中将不会均匀或汇合生长，这是能够测量抑制晕圈的必要条件，此外，晕圈会产生比正常更大的事实。
-接种量过大会导致光晕小于正常值。
-不遵守光盘之间的距离会导致一个光环与另一个光环重叠，并且无法正确读取它们。
-与CO 2一起孵育会增加四环素和甲氧西林光盘的光晕大小。
-在低于35°C的温度下孵育会产生较大的光晕。
-添加血液会减少磺胺晕的大小。
局限性
抗菌素谱图中显示的抗生素对微生物（体外）的敏感性并不能保证它会在体内起作用。
质量检查
要知道培养基中是否含有足够的胸腺嘧啶，必须种植一株粪肠球菌ATCC 29212，并测试对甲氧苄啶磺胺甲基异恶唑（SXT）的敏感性，其晕圈必须等于或大于20 mm才能令人满意。
参考文献
- “穆勒-欣顿琼脂。” 维基百科，免费百科全书。2018年11月16日，12：23 UTC。2019年一月27日，04:22
- 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。
- Cona E.通过琼脂扩散试验进行良好药敏性研究的条件。Rev Chil Infect，2002年；19（2）：77-81
- Difco Francisco Soria Melguizo实验室。MüellerHinton琼脂含5％的绵羊血。2009年，可访问：http：//f-soria.es
- BDMüellerHinton II琼脂实验室。2017年可用.bd.com
- 大不列颠实验室。米勒·欣顿琼脂。2015.可用在：britanialab.com
- Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
- Martínez-RojasD. AmpC型β-内酰胺酶：表型检测的一般性和方法。Soc。Ven牧师 微生物。2009; 29（2）：78-83。可在以下网站找到：scielo.org。
- Perozo A，Castellano M，Ling E，Arraiz N.铜绿假单胞菌临床分离株中金属β内酰胺酶的表型检测。 Kasmera，2012年； 40（2）：113-121。可在以下网站找到：scielo.org。