所述琼脂LIA（赖氨酸铁）是用于识别肠杆菌科的细菌的生物化学测试。此介质是由爱德华兹和法夫（Fife）根据Falkow公式创建的。
最初，该测试是含有蛋白ept，酵母提取物，葡萄糖，L-赖氨酸，溴甲酚紫和蒸馏水的肉汤。Edwards和Fife添加了琼脂，柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠。
赖氨酸脱羧的正面和负面测试。资料来源：作者MSc的照片和图表属性。玛莉莎·吉尔（Marielsa gil）
该测试主要包括证明赖氨酸脱羧酶的存在，该酶能够与氨基酸L-赖氨酸的羧基反应。由于赖氨酸脱氨酶的存在，氨基酸的脱氨也可能发生。
另外，培养基的组成显示某些细菌属产生硫化氢的能力。最后，还可以观察介质中气体的产生或不产生。
基础
蛋白ept和酵母提取物
像大多数培养基一样，赖氨酸铁琼脂中含有的成分为细菌的生长提供了必需的营养。这些成分以蛋白ept和酵母提取物为代表。
葡萄糖
同样，这种琼脂含有葡萄糖作为可发酵的碳水化合物。已知肠杆菌科的所有细菌都会发酵葡萄糖。
该步骤至关重要，因为它将负责酸化培养基，这是赖氨酸脱羧酶（如果存在）在其底物上起作用的必要条件。
在某些细菌属中，可以观察到由于葡萄糖发酵产生的气体。
当琼脂在试管中移位，在试管底部留有空白或通过将培养基分成两部分或更多部分时，可证明存在气体。
L-赖氨酸
赖氨酸脱羧后，就会形成二胺（尸胺）和二氧化碳。
在辅酶吡co醛磷酸盐的存在下发生脱羧。该反应是不可逆的。
PH指示剂（溴甲酚紫）
紫色溴甲酚pH指示剂可检测各种反应在培养基中发生的所有pH变化。
从这个意义上说，当发生酸化时，介质会变成黄色，而当发生碱化时，介质会恢复为原始的紫色或紫色。
当由于赖氨酸脱氨酶的存在而发生赖氨酸脱氨时，表面上会形成红色，这在变形杆菌属，普罗维登西亚属和一些摩根氏菌属中很常见。
这是由于在脱氨过程中形成了α-酮碳酸，它在氧气存在下与柠檬酸铵反应，导致上述颜色。
柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠
另一方面，产生硫化氢的细菌将通过硫代硫酸钠（硫的来源）和柠檬酸铁铵（H 2 S 的显影剂）的存在来证明。
具有硫代硫酸盐还原酶的细菌具有通过还原存在的硫代硫酸钠，形成亚硫酸盐和硫化氢（H 2 S）起作用的能力。
后者是无色气体，但是当与铁盐反应时会形成亚铁金属硫化物，这是一种不溶性化合物（可见的黑色沉淀物）。
但是，用这种介质形成H 2 S 的能力不是很可靠，因为某些能够产生H 2 S的赖氨酸脱羧酶阴性细菌不会形成黑色沉淀，因为介质的酸度会干扰。因此，建议与其他含铁的介质一起检查。
测试解释
赖氨酸脱羧
孵育24小时后，应读取试管，否则可能会误解反应，并报告假阴性。
必须记住的是，发生的第一个反应将是葡萄糖的发酵，因此10到12小时后所有试管将变成黄色。
如果在孵育时间（24小时）结束时观察到黄色背景，表面呈紫色或紫色，则反应为阴性。表面的紫色对应于通过使用蛋白the对介质的碱化。
阳性反应是指管的底部和表面完全呈紫色，即恢复为原始颜色。
因此，确定测试阳性的人是介质的基础或背景。如果对颜色有疑问，可以将其与未接种的LIA管进行比较。
赖氨酸的脱氨
显示赖氨酸脱氨的试管表面会呈现带红色的栗色表面和黄色（酸性）背景，或整个试管呈带红色的栗色。
该反应被解释为对于赖氨酸脱羧为阴性，但是对于赖氨酸脱氨为阳性。
此反应在边框上定义和解释。
硫化氢（H
通过在全部或部分培养基中出现黑色沉淀物，可以观察到阳性反应。通常在斜角的边缘和底部之间。
如果沉淀物遍布整个试管，则不会显示出在中间发生的其他反应。
结果记录
解释测试时，结果记录如下：
首先读取斜角，然后读取底部或块，然后读取H 2 S产量，最后读取气体产量。
例如：K / A +（-）。这表示：
- K：碱性边框（紫色）
- A：酸性背景（黄色），即负脱羧反应和负脱氨基。
- +：硫化氢的产生
- （-）：无气体。
制备
称取35 g脱水铁琼脂赖氨酸培养基，并溶于一升蒸馏水中。
加热直至琼脂完全溶解，然后使其沸腾一分钟，并经常搅拌。将4 ml培养基分配到带棉帽的13/100试管中。
在121℃的高压釜中灭菌15分钟。从高压釜中取出，并以一定角度站立，这样可以形成一个深底和一个短斜角。
存储在2-8°C的冰箱中。在播种细菌菌株之前先使其升温。
脱水培养基的颜色为米色，制备的培养基为红紫色。
制备的培养基的最终pH为6.7±0.2
介质在pH值5.2或以下时变为黄色，在pH 6.5或以上时变为紫色。
应用领域
该测试与其他生化测试一起用于鉴定肠杆菌科的杆菌。
用直环或针头播种培养基，在试管底部进行一两次刺穿，然后将培养基表面刻成锯齿形。
在需氧量下于35-37°C孵育24小时。如果需要，将其再孵育24小时。
区分乳糖阴性柠檬酸杆菌和沙门氏菌主要有用。
资料来源：Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
参考文献
- Mac Faddin J.（2003）。生化测试用于鉴定具有临床重要性的细菌。第三版。社论泛美。布宜诺斯艾利斯。阿根廷。
- 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。
- Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
- 大不列颠实验室。赖氨酸铁琼脂。2015.可用在：britanialab.com
- BD实验室。BBL赖氨酸铁琼脂倾斜。2007。可在以下网站找到：bd.com
- Valtek实验室。中型LIA2009。可在：andinamedica.com上获得。