的EMB琼脂是用于革兰阴性杆菌的固体培养隔离，特别是肠杆菌科和其他革兰氏阴性菌要求不高的选择性和鉴别培养基。它也以缩写EAM闻名，EAM代表曙红-亚甲基蓝。
该培养基由Holt-Harris和Teague于1916年创建。它包含蛋白ept，乳糖，蔗糖，磷酸氢二钾，琼脂，曙红，亚甲蓝和水。它与MacConkey琼脂非常相似，尤其是在使用不含蔗糖的Levine改良EMB琼脂时。
大肠杆菌在EMB琼脂上的金属光泽来源：Carmen MorenoGonzález，来自Wikimedia Commons
实际上，尽管它们在生物学上是不同的，但由于它们执行相同的功能，因此每个实验室都决定是否使用它们。
就Proteus属的蜂群生产而言，它甚至具有与经典MacConkey琼脂相同的缺点。因此，为了避免这种现象，可以将琼脂浓度提高最多5％。
基础
可选择的
EMB琼脂具有微妙的选择性，因为它含有苯胺染料（曙红和亚甲基蓝），后者可作为抑制剂，阻止大多数革兰氏阳性细菌和某些精妙的革兰氏阴性细菌的生长。
但是，这种琼脂的缺点是某些革兰氏阳性细菌可以抵抗抑制性物质的存在，并以小的无色点状菌落生长，例如粪肠球菌和一些葡萄球菌。
某些酵母菌也可以生长，例如白色念珠菌复合物，它将产生非常小的粉红色菌落。如果样品是深种子的，衣原体甚至可以从这种酵母中产生。
微分
另一方面，EMB琼脂也是一种差异培养基，因为这些染料（曙红和亚甲基蓝）一起具有在酸性pH下形成沉淀的特性，因此它们可作为其生产的指标。
因此，弱乳糖或蔗糖发酵细菌会在24至48小时内产生紫色菌落。例如克雷伯氏菌属，肠杆菌属和沙雷氏菌属。
那些强烈发酵乳糖的细菌（例如大肠杆菌）或蔗糖（例如小肠结肠炎耶尔森氏菌或彭氏变形杆菌）会形成绿黑色沉淀，在这些物种中具有特征性的金属光泽外观。
应该注意的是，如果使用EMB葡萄干培养基（无蔗糖），则小肠结肠炎耶尔森氏菌和Penneri变形杆菌将产生清晰的菌落。
蛋白p的存在会滋养不发酵乳糖或蔗糖的细菌，蛋白provide可提供细菌生长所需的氨基酸和氮，并产生清晰的菌落。例如，沙门氏菌属和志贺氏菌属等。
同样，重要的是要注意，不动杆菌属可以呈现薰衣草蓝菌落，即使它不是乳糖发酵剂或蔗糖，但具有在其细胞壁中固定亚甲基蓝的性质。其他氧化细菌也可能发生这种情况。
制备
原始的脱水培养基为浅米色。
为了制备这种培养基，必须称重36克的脱水培养基并将其悬浮在装有一升蒸馏水的烧瓶中。
将混合物静置5分钟后，将烧瓶移至热源，剧烈持续搅拌直至沸腾并完全溶解。
随后，必须使用高压釜在121°C下将已溶解的培养基灭菌15分钟。
最后，将其从高压釜中取出，放置一会儿。然后，在每只无菌培养皿中仍温热（45-50°C），加入15-20 ml琼脂。介质应为石蕊蓝。
食用后，将板稍微盖好，直到琼脂稍微冷却。然后将它们覆盖并完全固化。随后，将它们放置在倒置的板架中，并保存在冰箱（8°C）中直至使用。
该程序优选在层流通风橱中或在本生灯之前进行以避免污染。
重要的是要记住，每个商品房都应标明准备培养基的重量。
培养基的最终pH必须为7.2±0.2
应用领域
该培养基用于播撒尿液和粪便或任何类型的临床标本，尤其是在怀疑存在非挑衅性革兰氏阴性杆菌的情况下，例如属于肠杆菌科的细菌在这种培养基上生长非常好。
志贺氏菌和沙门氏菌属的肠道致病菌以无色或淡琥珀色菌落为特征。
其他非乳糖发酵杆菌，如气单胞菌，假单胞菌，不动杆菌等也都在生长。
同样，该介质在食品和水的微生物学分析中也非常有用，因为它是确定大肠菌群的完整确认阶段的理想选择，也就是说，可以确认混浊的EC肉汤中的大肠杆菌的存在。最可能的数字技术（MPN）。
质量检查
为了验证新鲜制备的培养基是否工作良好，可以种植对照菌株以观察菌落的特征并验证它们是否如预期的那样。
为此，可以使用ATCC菌株或大肠杆菌，产气肠杆菌，克雷伯菌，鼠伤寒沙门氏菌，弗氏志贺氏菌，铜绿假单胞菌和一些革兰氏阳性细菌，例如金黄色葡萄球菌。
大肠杆菌有望产生具有绿色金属光泽的深蓝色菌落。而产气肠杆菌和克雷伯菌应产生发达的蓝黑色粘液菌落。
另一方面，鼠伤寒沙门氏菌和弗氏志贺氏菌必须形成大的菌落，无色或略带琥珀色。
最后，铜绿假单胞菌属生长为不规则大小的无色菌落，而革兰氏阳性菌应被完全抑制或稀疏地生长，菌落很小。
最后的想法
有时灭菌会导致亚甲蓝减少，呈现中等橙色。为了使亚甲蓝氧化并恢复紫色，必须将其轻轻混合直至颜色恢复。
另外，在灭菌后，染料可能会沉淀，因此在培养皿之前应将其充分混合。
参考文献
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