CZAPEK琼脂：原理，制备，用途和限制 - 生物学 - 2025

在察氏（CZA）是专门用于生长腐生细菌和真菌设计选择性固体培养基。它是由来自波兰的植物学家Friedrich Johann Franz Czapek和美国化学家Arthur Wayland Dox共同创建的。因此，这种琼脂也称为Czapek-Dox培养基。

原始培养基是液体，但后来添加了琼脂使其成为固体培养基。Czapek培养基由硝酸钠，磷酸氢二钾，硫酸镁，氯化钾，硫酸亚铁，蔗糖，琼脂和蒸馏水组成。

Czapek琼脂A.寄生曲霉B.烟曲霉来源：A. Medmyco / B。照片：David Midgley博士。Wikipedia.com

Czapek琼脂的pH值为7.3，但有一个变体，其中添加了10％的乳酸，其pH值保持在3.5。该酸性培养基用于嗜酸性微生物的培养。

另一方面，一些商品房通过用甘油磷酸酯改变硫酸镁和磷酸氢二钾来改变Czapek琼脂的组成。这种修饰防止了用常规配方观察到的磷酸镁沉淀的形成。同样，还有另一种添加酵母提取物的变体。

最后，美国公共卫生协会APHA推荐将Czapek琼脂用于放线菌属，曲霉属，拟青霉属和青霉属的研究。这些物种的特征是环境微生物和机会病原体。

基础

这种培养基含有蔗糖。该碳水化合物用作碳源，而硝酸钠是氮源，但与其他介质不同，提供的氮是无机的。

由于这个原因，Czapek培养基被认为是选择性的，因为只有能够将无机化合物用作唯一氮源的微生物才能生长。

介质的渗透压的调节物质是磷酸氢二钾。就硫酸镁，氯化钾和硫酸亚铁而言，它们为腐生（自由生活）微生物的生长提供了必需的矿物质。该配方形成磷酸镁的沉淀。

最后，琼脂是为培养基提供固体稠度的化合物，水是所有组分的溶剂。

使用改良的Czapek琼脂配方，不会形成沉淀，并且可以改善某些真菌的生长性能。

酸Czapek琼脂的极强酸度使其成为更具选择性的培养基，仅允许嗜酸性微生物的生长，能够利用无机氮。同时，Czapek酵母琼脂可改善某些蘑菇的性能。

制备

中型Czapek-Dox

称出49 g的脱水培养基并溶于蒸馏水。加热直到沸腾。经常摇动混合物直至完全溶解。

-Czapek琼脂楔

将溶解的混合物分配到试管中，并在121°C下高压灭菌15分钟。从高压釜中取出时，在放下试管之前将其均质并固化。

-Czapek琼脂板

将溶解的混合物在121°C高压灭菌15分钟，然后将其冷却至50°C，匀浆并倒入20 ml无菌无菌培养皿中。让其固化，倒置并保存在冰箱中直至使用。

pH值应保持在7.3±0.2。脱水介质的颜色为白色，制得的介质为淡琥珀色，由于存在絮凝沉淀物，因此略带混浊。

酸性pH的Czapek培养基

如前所述进行准备，但是每升准备的培养基要添加10 ml无菌10％乳酸。改良的Czapek培养基的pH值应为3.5±0.2。

改良的Czapek培养基

称量45.4 g脱水培养基，溶于1升水中。其余准备工作与上述相同。脱水培养基的颜色为白色，制备的培养基为白色。培养基的最终pH为6.8±0.2。

扎佩克酵母培养基

也称为Czapek酵母提取琼脂（CYA）。它包含经典Czapek琼脂和酵母提取物的元素。

用

Czapek培养基用于在土壤，蔬菜，谷物，空气，昆虫等样本中搜索腐生微生物。

酸性pH下的Czapek琼脂用于嗜酸微生物的生长，而改性的Czapek琼脂对于在白色念珠菌复合体中形成衣原体孢子特别有用。

最后，Czapek酵母琼脂对于分离曲霉和青霉非常有用。

播种

-Czapek琼脂

要在土壤中寻找放线菌，请按照以下步骤操作：将样品用酚水处理30分钟，然后将1 mL悬浮液播种在Czapek琼脂上。在28°C下孵育5至7天。

对于蔬菜，谷物和昆虫样品，将它们直接放在琼脂上。您也可以稀释并在琼脂表面上播种0.1 ml。

-改良的Czapek琼脂

对于播种，使用直环或针头，将其浸入药签中，然后通过刺穿直至琼脂接触板的底部来接种琼脂。在28°C下孵育24小时，并在平板上方和下方的显微镜下检查，看看是否形成了衣原体孢子。

孵育温度和时间

孵育温度和时间取决于要分离的微生物的类型。通常将板在20至25°C的温度范围内孵育一到两周。

但是，某些菌株有特定条件。例如，曲霉属的大多数物种在30°C时生长最佳；但是烟曲霉在50°C下生长。

关于孵育时间，一到两周是正常的，但是白色念珠菌可在25°C下于24至48小时内发育。

该培养基上某些菌落的特征

-青霉

它在27°C下孵育12天后发育。它们的菌落很小（25毫米）。

菌落具有天鹅绒般的外观，带有明确的白色边框，中心处的蓝绿色调随着年龄的增长而变成灰色。菌落的背面是橙色，由于产生了色素，使中间的颜色相同。

-黑曲霉

与白色到黄色的菌丝体和黑色的孢子一起发育。

-白色念珠菌

形成奶油色浅米色菌落。在改良的Czapek琼脂中，它形成衣原体孢子。

-寄生曲霉

在25°C下7天内会形成深绿色的菌丝体。

质量检查

为了评估培养基的质量，可以种植认证的对照菌株，例如：黑曲霉MKTA 16404，白色念珠菌MKTA 10231。

黑曲霉在约5天的时间内会形成白色至黄色的菌丝体和黑色的孢子，而白色念珠菌在25°C的培养24小时内将具有令人满意的生长；菌落是乳白色的。

局限性

一些研究表明，对于放线菌的回收，产量最高的琼脂是马铃薯葡萄糖琼脂，其次是Czapek琼脂，但是对于曲霉菌和青霉菌的回收来说，Czapek琼脂是提供最高回收率的琼脂。

参考文献

1. DávilaM等。对农业具有重要意义的植物病原真菌的拮抗放线菌。墨西哥牧师 科学。农业学报2013，4（8）：1187-1196。可在以下网站找到：scielo.org。
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4. 康达Pronadisa实验室。改良的Czapek-Dox琼脂。可用在：condalab.com
5. 文化媒体Microkit。Czapek-Dox琼脂。Diosponible in：Medioscultivo.com