的CLED琼脂（胱氨酸-乳糖-电解质-缺陷）是一种固体培养基差，用于尿路感染的诊断。培养基的成分设计用于良好生长尿液病原体，是定量菌落形成单位（CFU）的理想选择。
CLED培养基是非选择性的，因为革兰氏阴性和革兰氏阳性微生物可以在其中生长。但这不是问题，因为大多数UTI仅由一种微生物引起。
CLED琼脂
如果发生多菌种感染，可以获得2或3种不同的细菌，但这是非常罕见的，并且在大多数情况下会被污染。
可以在这种培养基中生长的革兰氏阴性细菌包括属于肠杆菌科的细菌和其他肠杆菌，尿液样本中最常分离出的尿路病菌包括：大肠杆菌，肺炎克雷伯菌，奇异变形杆菌，摩根氏摩根氏菌，铜绿假单胞菌等。
同样，在这种培养基中可以生长的革兰氏阳性细菌中，可以生长的是金黄色葡萄球菌，腐生葡萄球菌，粪肠球菌，无乳链球菌，棒状杆菌，乳酸杆菌，甚至酵母，如白色念珠菌复合体。
但是，由于培养基的化学组成，它不允许某些苛刻的泌尿生殖道病原体生长，例如淋病奈瑟氏球菌，阴道加德纳氏菌等。
CLED琼脂原理
CLED培养基具有肉提取物，酪蛋白的胰水解产物和明胶的水解产物作为能量源。它们为不需要的细菌的生长提供营养。
它还含有胱氨酸，胱氨酸是一种允许大肠菌生长的氨基酸，其大小可区分。
同样，它含有乳糖作为可发酵的碳水化合物，因此该培养基具有差异性。能够将发酵细菌与非乳糖发酵区分开来。
发酵细菌会通过产生酸而使培养基的pH值发生变化，从而形成黄色菌落，而非发酵细菌则不会在培养基中产生变化，因此它们呈现出原始琼脂的颜色，即绿色。
由于存在pH指示剂，发酵反应得以揭示，该指示剂在该培养基中为溴百里酚蓝。
另一方面，培养基中低的电解质浓度会抑制变形杆菌属的典型侵袭性生长，这种现象称为群聚效应。由于它允许对CFU进行计数（包括是否存在变形杆菌属），因此它比其他介质更具优势。
然而，低浓度的电解质抑制了志贺氏菌属某些物种的生长，与其他培养基相比，这是一个缺点。
CLED琼脂的原理（Bevis）
贝维斯（Bevis）生产的这种培养基有一种变种或修饰，他将酸性品红（安德拉德指示剂）掺入了原始成分中。它与溴百里酚蓝结合使用，以区分发酵菌和非发酵菌。
常规培养基和改良培养基之间的区别是菌落呈现的颜色。在乳糖发酵细菌的情况下，菌落变成带有橘红色或红色光环的红橙色，而非发酵菌则是蓝灰色的。
应用领域
CLED琼脂专门用于接种尿液样品。在欧洲实验室中，这种介质的使用尤其频繁，而在美国，这种介质的使用较少。
样本采集必须满足某些参数才能获得可靠的结果，包括：
- 采样前不要服用抗生素。
- 当无法通过侵入性方法采集样本时，最好早晨在第一时间采集尿液，因为尿液会更加浓缩。
- 采集样本前，请彻底清洗生殖器。
- 丢弃第一排小便，然后放置容器。
- 在标签明确的无菌容器中收集25至30 ml尿液。
- 立即送到被冰包围的实验室。
- 它必须在发布后2小时内进行处理，或者在4°C下冷藏最多24小时。
播种尿液样本
尿液样本应按1:50稀释。
为了稀释，放置0.5 ml患者尿液并用24.5 ml无菌生理溶液稀释。
量取0.1 ml稀释的尿液，并用drigalski刮刀在CLED介质上铺开表面。这是计数菌落的最佳播种方法。因此，它被用于尿液样本中，因为结果必须以CFU / ml表示。
要量化获得的菌落，请按以下步骤进行：在板上计数菌落，依次乘以10和50。这将为您提供CFU / ml尿液的量。
解释
计数高于100,000 CFU / ml-–表示尿道感染
计数低于1000 CFU / ml- –无感染
计数在1000-10,000 CFU / ml之间–可疑，可能的污染，重复采样。
ID
在CLED琼脂上生长的菌落应具有革兰氏菌，根据微生物的形态特征，可以进行一定的继代培养。
例如，如果它是革兰氏阴性杆菌，则将其播种在MacConkey琼脂上，在此可以确认是否进行乳糖发酵。另外，附着营养琼脂以进行氧化酶测试。
如果革兰氏菌显示出革兰氏阳性球菌，可以在咸甘露醇琼脂和营养琼脂上继代培养。在后者中，进行过氧化氢酶测试。最后，如果观察到酵母，则将其播种在Sabouraud琼脂上。
许多实验室避免使用CLED培养基，而只喜欢使用血琼脂，MacConkey和营养琼脂来接种尿液样本。
制备
在装有一升蒸馏水的烧瓶中溶解36.2 g CLED琼脂粉末。静置5分钟后，加热重悬的琼脂，不断搅拌煮沸1分钟。
然后在高压釜中于121°C消毒15分钟。最后，将其从高压釜中取出，冷却至45°C。随后，将15-20ml装在每个无菌培养皿中。
印版服务程序必须在层流罩内部或本生灯的前面进行，以避免污染。
所使用的板固化，放置在倒置的架子上，并保存在冰箱（2-8°C）中直至使用。
制得的培养基的最终pH应为7.3±0.2。
参考文献
- 尿道感染的微生物学诊断建议。辣椒 感染 2001年；18（1）：57-63。可在以下网站找到：scielo.org。
- Panchi J.在进行膀胱导管插入术的住院患者中鉴定导致尿路感染的微生物。2016.取得临床实验室学位的本科工作。安巴托工业大学。厄瓜多尔
- 大不列颠实验室。CLED介质。网址：britanialab.com。
- Renylab实验室。使用说明，CLED琼脂。2013年可用：es.renylab.ind.br。
- 高品质的实验室。微生物学基本手册。可在以下网址获得：ictsl.net。
- MuñozP，Cercenado E，Rodríguez-CréixemsM，DíazMD，Vicente T，BouzaE。尿液常规培养中的CLED琼脂选项。前瞻性和比较性评估。诊断微生物感染病。1992年；15（4）：287-90。
- GarcíaP，Paredes F，Fernándezdel Barrio M.（1994年）。实用的临床微生物学。加的斯大学，第二版。UCA出版物服务。