BIGGY琼脂：基本原理，制备方法和用途 - 生物学

所述琼脂BIGGY是固体介质的选择性和差动培养。它旨在隔离和帮助鉴定主要念珠菌物种。它的名字BIGGY来自英文Bismuth Glucose Glycine Yeast的首字母缩写。

原始配方是由尼克森（Nickerson）创建的，这就是为什么这种培养基也被称为尼克森琼脂的原因。目前，它由酵母提取物，甘氨酸，葡萄糖，柠檬酸铵，柠檬酸铋，亚硫酸钠和琼脂组成。

BIGGY琼脂的图形表示。资料来源：Flickr.com

BIGGY琼脂经配制可用于区分复杂的白色念珠菌，热带念珠菌，克鲁斯氏菌和开菲氏菌，但其他种类也可以生长，例如光滑念珠菌，副念珠菌，gu.erillimondii，Trichosporun sp，念珠菌。和酿酒酵母。

它具有良好的敏感性和特异性，但是，与功能相似的其他培养基相比，它仅次于CHROMagar。因此，尽管价格昂贵得多，但许多实验室更喜欢后者。

应当清楚的是，使用BIGGY琼脂以及其他类似方法有助于快速推定鉴定，但决不能证实。因此，必须有其他识别方法。例如，Vitek 32和API 20识别系统。

基础

BiGGY琼脂被认为是用于分离酵母（尤其是念珠菌属）的部分选择性培养基，尽管其他属也可以生长。

它也是一种差异培养基，因为根据所涉及的物种，会在外观，颜色，形状和大小方面观察到不同的特性。由于菌落中形成了不同的颜色，因此被视为发色培养基。

酵母菌落的颜色是由于琼脂中存在亚硫酸铋。尼克森认识到假丝酵母属的酵母在胞外还原亚硫酸铋，将其转变为硫化铋（一种不可溶的黑色物质）。这导致浅棕色至黑色菌落。

这种琼脂含有酵母提取物和葡萄糖，后者为酵母的发育提供了基本的营养和能量来源。甘氨酸是一种酵母生长刺激剂，同时它抑制某些细菌的生长。

从同样的意义上讲，柠檬酸铵和柠檬酸铋以及亚硫酸钠可作为细菌生长的抑制剂。琼脂是赋予中等固体稠度的试剂。

称取45 g脱水培养基，并溶于一升蒸馏水中。摇动并加热混合物，煮沸1分钟直至完全溶解。该培养基不可高压灭菌。

在水浴中冷却至约45°C后，将20 ml倒入无菌培养皿中。

脱水介质的颜色为黄灰色，制备为黄白色凝胶，其中可观察到轻微的絮凝沉淀。

pH值应为6.8±0.2。

准备好的培养基应保存在冰箱（4°C）中并避光。由于它是无法高压灭菌的介质，因此应尽快使用。建议在制备后3天之前使用。

将板在室温（25°C）下孵育24、48和72小时，孵育时间可延长至5天。

每种念珠菌都有一定的特征，使它们彼此区分。介质的制造商针对每种物种描述以下特征：

-白色念珠菌复合体：在此琼脂上发育为光滑，圆形，棕色或黑色的菌落，带有轻微的菌丝体边界。除了深色不会扩散到中间。

-热带假丝酵母：明亮，小，深褐色的菌落，中心黑色，菌丝体边缘略带黑色。孵育72小时后，深色光向中间扩散，这是该物种的典型特征。

-克鲁斯念珠菌发育大的，扁平的，粗糙的菌落，边界为棕色至黑色。

-Candida parakrusei：中等大小的菌落，大多数时候是粗糙，平坦的。颜色可以从明亮的深红棕色到浅红棕色。菌落的边界有广泛的淡黄色菌丝体。

-Cella stellatoidea：发育中等，扁平的菌落，黑褐色，几乎黑色。菌丝的发育非常稀缺。

Yücesoy和Marol于2003年进行的一项研究表明，与BIGGY琼脂相比，CHROMagar培养基对不同念珠菌物种的分化和鉴定具有更好的敏感性和特异性。

为了进行无菌控制，将未接种的平板在25°C下于黑暗中孵育24至48小时，预计没有任何种类的生长或颜色变化。

建议用于培养基质量控制的ATCC菌株为：

白色念珠菌ATCC 60193复合物，光滑念珠菌ATCC 2001，克鲁斯念珠菌ATCC34135。如上所述，所有这些物质均有望生长。

也可以使用以下菌株：

大肠埃希氏菌ATCC 25922，铜绿假单胞菌ATCC 27853和表皮葡萄球菌ATCC12228。在前两个中，预期会完全抑制，但如果部分生长，菌落将呈乳白色。

对于金黄色葡萄球菌，预期它会被完全抑制，但是如果它部分生长，它的菌落是白色的。

一些细菌能够在这种培养基中生长，甚至可以变黑，从而模拟假丝酵母菌落，但是在涂抹菌落并在显微镜下观察时，很容易将其丢弃。

表：根据YücesoyM和Marol S 的工作，BIGGY 琼脂上一些酵母菌落的特征。

来源：YücesoyM，MarolS。CHROMAGAR念珠菌和BIGGY琼脂在鉴定酵母菌种中的性能。安临床微生物抗微生物剂。2003; 2（8）：1-7