该BHI琼脂或脑心浸液琼脂培养基是营养固体培养。在西班牙语中，我们将其称为“脑心浸液琼脂”。它是一种非选择性培养基，这意味着可以培养出所有类型的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌，以及一些酵母菌和丝状真菌。
它由小腿脑和心脏的灌注，动物组织的消化性水解产物，酪蛋白的胰腺水解产物，氯化钠，葡萄糖，磷酸二钠和琼脂组成。
BHI板。资料来源：作者MSc摄。Marielsa Gil。
应该注意的是，BHI琼脂是细菌实验室中最常用的培养基之一。它可以不加补充剂就可以用作原代培养，在其他选择性培养基上获得的菌落的继代培养或在实验室中用于菌株的维持。
另一方面，它是用于制备诸如血琼脂和巧克力琼脂的富集培养基的基础的理想培养基。从营养的角度来看，两者都是分离高要求微生物的理想选择。但是，应该注意的是，由于它含有葡萄糖，因此不适合观察溶血模式。
同样，BHI琼脂也可用于制备特殊培养基，以分离常见培养基中难于生长的病原微生物，其中包括：嗜血杆菌，土拉弗朗西斯菌，白喉棒状杆菌和荚膜组织胞浆菌。
有了抗生素添加剂，BHI琼脂就成为分离真菌的选择性培养基。
基础
它是一种营养培养基，可以分离中等需求的微生物，并且可以通过添加血液和其他营养补品来增加其丰富度。
它是一种非选择性培养基，因此可以使大多数革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌以及某些真菌生长。但是，可以通过添加抗生素使其具有选择性。
培养基包含小腿脑和心脏的输注，动物组织的消化性水解产物和酪蛋白的胰腺水解产物；所有这些化合物都是维生素，氨基酸，氮和碳的来源。
葡萄糖是一种碳水化合物，一旦微生物发酵就可以为微生物提供能量。同时，氯化钠和磷酸氢二钠保持渗透平衡，并提供接近中性的pH。最后，琼脂具有中等的固体稠度。
制备
称重52克脱水培养基，并溶于一升蒸馏水中。将混合物带到热源直至沸腾，在溶解过程中经常搅拌。
BHI琼脂平板或楔子可在不添加添加剂的情况下制备。
楔子
对于楔形物的准备工作，直至准备就绪，直到每个管的一半都装满为止，盖上盖子并在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟，然后将其放置在基座上直至其固化。以后将其存放在冰箱中直至使用。
BHI楔形菌。资料来源：作者MSc摄。Marielsa Gil。
板块
将溶解的混合物在121°C高压灭菌15分钟，放置后将其冷却至50°C，并将20 ml培养基在无菌培养皿中盛装。它们可以固化，倒置并保存在冰箱中直至使用。播种前让板达到室温。
培养基的pH值必须保持在7.4±0.2。
原始介质为米色，制备的介质为浅琥珀色。
血琼脂的制备
在对培养基进行灭菌后，冷却至大约45至50°C的温度，然后添加血液（50 ml），轻轻混合使其匀浆，并在每个培养皿中无菌加入20 ml。如果在板上形成气泡，则较轻的火焰应迅速通过气泡上方以消除气泡。
同样，当混合物温度达到45至50°C时，可以通过添加相应的添加剂来制备特殊介质。
介质保持樱桃红色。
应用领域
无需补充即可使用
不含添加剂的BHI琼脂可用作原代培养，可播种纯种低或中等需求的微生物菌株，以便随后鉴定。
由于它是一种浅色介质，因此非常适合观察颜料，并且由于它不含干扰物质，因此可以对其进行一些生化测试，例如氧化酶和过氧化氢酶，或者可以从此菌落中进行其他生化测试。琼脂。
同样，BHI琼脂楔被广泛用于实验室中一定时间范围内的菌株维持（细菌）。
将表面接种有细菌菌株的平板或楔形物在37°C下孵育24至48小时。同时，在真菌中，温度和孵育时间将取决于所寻求的真菌类型。
作为准备其他培养基的基础琼脂
在此基础上，可以制备丰富的选择性培养基。
丰富
它的主要功能是作为制备微生物实验室常规使用的血琼脂的基础。特别地，BHI碱基有利于链球菌sp的分离。然而，它具有不适合观察溶血模式的缺点，因为它含有葡萄糖。
它也用于制备兔或马血琼脂，以分离嗜血杆菌。为了获得最佳结果，可以添加浓缩补充剂（IsoVitaleX）。
如果样品来自呼吸道，可以将杆菌肽添加到琼脂中以抑制伴随的菌群并增加嗜血杆菌菌株恢复的可能性。
或者，可以制备带有胱氨酸亚碲酸盐的血琼脂（羔羊或人）以分离白喉棒状杆菌。同样，制备兔血琼脂，添加胱氨酸和葡萄糖可用于分离土拉弗朗西斯菌也是有用的。
血琼脂平板的接种是用尽的，将它们在微需氧性（5-10％CO 2）下于35-37°C孵育24-48小时。
可选择的
这种添加了抗生素的培养基可以代替Sabouraud琼脂来分离真菌。
BHI琼脂与氯霉素-庆大霉素或青霉素-，链霉素和马血的组合是分离荚膜组织胞浆的理想选择。
根据要分离的微生物，建议在需氧条件下于35-37°C或室温下孵育。有时需要在两个温度范围内孵育，为此需要使用2个平板。
一些真菌，例如毛癣菌（Trichophyton mentagrophytes），必须在室温下孵育最多7天。
质量检查
从准备的每批样品中，建议在37°C下孵育1个平板或楔形物24小时，并确认没有任何生长。在制备血琼脂时，它特别重要，因为它是一种容易被污染的培养基。
另一方面，可以通过接种已知或认证的标准菌株并观察其发育来评估培养基的质量。
从这个意义上说，要评估不含添加剂的BHI琼脂，可以使用大肠杆菌ATCC 25922，金黄色葡萄球菌ATCC 25923或白色念珠菌ATCC 10231菌株，将它们在37°C的需氧条件下孵育24至48小时。在所有情况下，都有望获得令人满意的增长。
可以接种化脓性链球菌ATCC 19615，肺炎链球菌ATCC 6305或薄荷毛癣菌ATCC 9533的菌株，以评估血琼脂平板。
细菌菌株在微需氧性下于37°C孵育24小时，而真菌则在室温下于潮湿箱中孵育长达7天。预计在所有情况下都将获得令人满意的增长。
参考文献
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