Rose Bengal是一种基于抗原抗体反应的实验室测试，用于诊断布鲁氏菌病。该技术可以检测人血清样品中针对流产布鲁氏菌的特异性抗体。结果可以定性或半定量报告。
定性形式表示患者对于测试是阳性还是阴性，即是否存在抗体。同时，半定量报告以IU / ml报告，并指出存在的抗体的近似量。应该注意的是，仅当患者与微生物接触时才会产生抗体。
玫瑰孟加拉反应在凝集板上。来源：取自视频https://youtu.be/igAVQ-GiyGY
由于它的简便性，高灵敏度和特异性，它是医学上最常用于诊断该疾病的血清凝集技术之一。
一些研究人员将Rose Bengal检验与其他技术（例如血清凝集（发热抗原））的功效进行了比较，并观察到虽然存在良好的相关性，但他们发现发热抗原检验呈阴性且孤立的案例正面耀斑。
获得的差异是由于这些患者具有针对流产布鲁氏菌的IgG抗体亚类，在酸性pH下具有更好的结合能力，因此他们可以与Rose Bengal试剂反应，而不与发热抗原反应。
从这个意义上讲，他们建议将热抗原技术的试剂修改为酸性pH，以便可以检测到这种情况。
基础
玫瑰红试剂由抗原悬浮液组成。它由流产布鲁氏菌的S99菌株组成，在酸性乳酸缓冲液（pH 3.6）中稀释，再加上苯酚和玫瑰红染料。
因此，在样品中寻找的是抗Brucella抗体，如果存在的话，它们将与试剂抗原反应并观察到肉眼可见的凝集反应。该测试可检测IgM抗体或IgG抗体。
这意味着它可以在IgM抗体占优势的急性期或IgG抗体占主导的慢性期检测出该疾病。
这代表了一个优点，因为它增加了测试的灵敏度，但是同时又是一个缺点，因为它与IgM和IgG抗体的反应相同，因此无法区分一个阶段和另一个阶段。
测试必须始终与阴性对照和阳性对照一起进行。阴性对照包含无抗体的动物血清，而阳性对照包含具有50 IU / ml抗Brucella抗体的动物来源血清。
用
布鲁氏菌病是一种严重的疾病，往往是慢性和危险的，因此及早诊断非常重要。这是一种人畜共患病，直接接触被污染的物质可能会感染人类，最脆弱的人是兽医和动物看护者。
除了其他形式的感染外，通过食用被感染的生肉也可能发生感染。
该疾病局部或全身发作。全身性形式最严重，因为可能会影响各种器官，包括网状内皮系统（肝脏，脾脏，骨髓），皮肤（纤维素炎和淋巴结病），呼吸系统（肺炎），肌肉骨骼系统（关节炎， cro关节炎和脊柱炎）。
玫瑰红试验是进行初始筛选的非常有用的技术，因为它非常便宜，易于使用并且具有很高的特异性和敏感性。
假阴性和假阳性的情况非常少见，分别发生在抗体滴度很低（<25 IU / ml）或极高（> 1000 IU / ml）的人群中。
处理
材料
-玫瑰孟加拉套件
-凝集板白色背景
-50 µl移液器
-旋转器（可选）
-涡流
技术（定性方法）
商业Rose Bengal试剂盒附带了现成的试剂。
-在开始工作之前，对试剂进行调温。
-凝集板画有圆圈，每个圆圈代表一个不同的样品。使用3个圆圈，第一个用于阴性对照，第二个用于样品，第三个用于阳性对照。
-将一滴或50微升的对照和样品放在其相应的圆圈中。
-使用涡旋混合玫瑰红试剂。在先前放置的旁边放置一滴。
-与木牙签混合（每个样本或对照使用一个）。进行圆周运动并传播，以便覆盖整个圆周。
来源：取自视频的图像：https：//youtu.be/igAVQ-GiyGY。编辑的图像布局。
-将板置于80至100 RPM的自动旋转器上，或手动旋转4分钟。在此时间结束时阅读证明。
-验证控件是否按预期提供。比较测试样品和对照的反应。如果观察到凝集，则报告为阳性；如果没有凝集，则报告为阴性。
阳性测试表明患者的抗Brucella抗体量等于或大于25 IU / ml。
解释阳性（有凝集）和阴性（无凝集）反应。资料来源：瓜氨酸。编辑的图像。
技术（半定量）
如果在定性反应中样品为强阳性，则可以半定量。为此，用生理盐水溶液对样品进行系列双重稀释。每种稀释液均进行上述步骤。
也可以通过肉眼观察凝集来解释。结果将是观察到阳性结果的最高稀释度的效价。
要计算抗Brucella抗体的近似值，请使用以下公式：
25 IU / ml x反应滴度= IU / ml
例如，如果处于半定量测试中的患者在½，¼和1/8稀释度下检测呈阳性，而从1/16稀释度开始呈阴性，则意味着该患者的滴度为8 。
应用公式：
25 IU /毫升x 8 = 200 IU /毫升
质量检查
-试剂盒有有效期，必须遵守。如果试剂已过期，则不应使用。
-在使用过程中，请确保试剂不含固体颗粒，因为这是变质的迹象。
-保持在2至8°C之间。
-请勿冻结，此举会极大地损坏试剂。
-始终与阴性和阳性对照一起进行测试。
-该技术可耐受具有一定程度的血脂和溶血的血清样品，但是不建议使用血脂过多和溶血的血清，这两种情况都会改变测试结果。
-在开始分析之前，始终将试剂置于室温下。
-不要解释比建议时间长的反应，因为这会生成假阳性报告，因为在一定时间后试剂会沉淀，从而模拟阳性反应。
-该技术100％敏感，特异性为98％。
-在半定量1000 IU / ml后，有可能观察到前区效应（由于抗原过量导致抗体过量，假阴性）。
参考文献
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