的尿素肉汤是液体培养基，用于检测脲酶的在某些微生物的存在。脲酶是一种以构成方式产生的微生物酶，也就是说，无论是否存在其作用的底物，它都是合成的。
脲酶的功能与有机化合物的分解有关。并非所有的微生物都能合成这种酶，因此在实验室对其进行测定可以鉴定某些细菌菌株，甚至可以区分同一属的种。
尿素测试阴性和阳性。资料来源：作者MSc摄。Marielsa Gil。
尿素测试有两种类型：Stuart和Christensen。它们的成分和敏感性不同。第一个特别显示出变形杆菌属产生大量的脲酶。
第二个更敏感，可以检测到其他细菌属后期产生的少量尿素酶，例如克雷伯菌，肠杆菌，葡萄球菌，布鲁氏菌，博德特氏菌，芽孢杆菌，微球菌，幽门螺杆菌和分枝杆菌。
斯图尔特的尿素肉汤由尿素，氯化钠，磷酸氢二钾，磷酸一氢钾，酵母提取物，苯酚红和蒸馏水组成。
同时，克里斯滕森的尿素肉汤或琼脂由蛋白ept，氯化钠，磷酸二氢钾，葡萄糖，尿素，酚红，蒸馏水和琼脂组成。后者仅当它是固体介质时。
基础
脲酶酶水解尿素形成二氧化碳，水和两个氨分子。这些化合物反应形成称为碳酸铵的终产物。
斯图尔特的尿素汤
Stuart的尿素肉汤在pH值为6.8时具有更多的缓冲作用。因此，微生物必须能够形成大量的氨以使酚红。pH值应高于8。
因此，斯图尔特的尿素肉汤对变形杆菌属具有选择性，在孵育后24到48小时内会产生阳性结果，对产生少量尿素酶或缓慢水解尿素的细菌无效。
这是因为变形杆菌物种能够使用尿素作为氮源。相反，其他产生脲酶的细菌需要额外的来源。
然而，佩雷斯等。（2002年）确定斯图尔特的尿素肉汤与克里斯滕森的尿素琼脂在测定假丝酵母，隐球菌，杜鹃花，曲霉菌和酿酒酵母属的酵母菌株中的脲酶方面一样有效。
该研究的作者声称，在孵育24和48小时后，与两种培养基（Stuart和Christensen）均达成了100％的一致性。除了设法使培养基变成深粉色-紫红色的菌株被认为是阳性菌。
这种澄清是必要的，因为Lodder（1970）指出几乎所有的酵母都能使Christensen尿素琼脂斜角变成淡粉红色。这是由于这样的事实，它们可以以最小的量水解尿素，并且通过表面氨基酸的氧化脱羧而形成胺。这不应被解释为肯定的。
克里斯滕森的尿素琼脂或肉汤
Christensen的尿素肉汤或琼脂缓冲较少，能够检测少量氨。此外，该培养基富含蛋白ept和葡萄糖。这些化合物会导致其他产生脲酶的微生物在斯图尔特肉汤中不生长。
同样，克里斯滕森尿素测试提供更快的结果，尤其是对于Proteus，能够在最少30分钟（最短时间）和最多6小时（最长时间）内给出强阳性。
其余产生脲酶的微生物设法在6小时后稍微改变培养基的颜色，并在24、48、72小时或更长时间后强烈改变培养基的颜色，甚至某些菌株在5或6天后也会产生微弱的反应。
两种媒体的诠释（斯图尔特和克里斯滕森）
培养基原本是橙黄色，发生阳性反应会使培养基的颜色变成粉红色的紫红色。颜色的强度与所产生的氨气量成正比。
阴性反应会留下原始颜色的培养基（酵母除外），而酵母可能会在克里斯滕森的尿素琼脂培养基上变成淡粉红色。
制备
斯图尔特的尿素汤
根据商业公司的指示称量必要的克。最好溶于无菌蒸馏水中。不要使用热来溶解，因为尿素对热很敏感。
膜过滤用于灭菌。为此，使用了孔径为0.45 µ的Millipore过滤器。不要使用高压灭菌器。溶液过滤后，将其分配到无菌试管中。为获得可靠的结果，每支试管应在最小量1.5毫升和最大量3毫升之间转移。
使用前应存放在冰箱中并加热。
如果没有过滤方法，应立即使用培养基以获得可靠的结果。
准备斯图尔特的尿素肉汤的另一种方法如下：
一些商品房出售用于尿素测试的基础培养基，不包括尿素。
称重商业公司指示的数量。将其溶于蒸馏水中，并在高压釜中于121°C灭菌15分钟。将其静置一会儿，待培养基温热后，加入100 ml 20％制备的尿素溶液，并通过过滤灭菌。
如前所述，它分布在无菌管中。
克里斯滕森的尿素琼脂或肉汤
-尿素溶液的制备
称出29克脱水尿素，并溶于100毫升蒸馏水。使用过滤方法进行灭菌。不要高压灭菌。
-尿素基础琼脂
将24 g脱水的基础琼脂溶解在950 ml蒸馏水中。在121°C的高压釜中灭菌15分钟。静置直至温度达到50°C，并无菌添加先前制备的尿素。
将4-5毫升倒入无菌试管中，并倾斜直至变成固体。应该有一个长笛喙。
该介质也可以以液体形式制备。
应用领域
鉴于Proteus提供的快速反应，尿素测试在区分Proteus属与肠杆菌科其他属方面非常有效。
测试使用克里斯滕森（Christensen）成分，有助于区分同一属的物种。例如，溶血链球菌和华氏链球菌是凝固酶阴性和β-溶血性葡萄球菌，但不同之处在于溶血链球菌是尿素阴性，而华氏链球菌是尿素阳性。
另一方面，McNulty成功地使用Christensen的2％尿素肉汤研究了从胃粘膜（肛门区域）采集的活检样品中是否存在幽门螺杆菌。
幽门螺杆菌的存在通过尿素试验阳性来证明。观察结果的持续时间与存在的微生物数量成正比。
可以看出，这是诊断胃活检中的幽门螺杆菌的简单方法。
最后，该测试对于区分布鲁氏菌属，博德特氏菌属，芽孢杆菌属，微球菌属和分枝杆菌属也很有用。
播尿素测试
两种方法都需要强力的微生物接种以优化结果。除少数例外，细菌菌落最好取自血琼脂和沙伯氏琼脂的酵母。接种物在液体介质中被乳化。
对于Stuart的尿素肉汤，请在37℃下孵育24至48小时，因为您只在寻找细菌时才在寻找Proteus菌株。对于酵母，可以在37°C或室温下孵育24至48小时。
对于Christensen的尿素肉汤，将其在37℃下孵育24小时。如果测试结果为阴性，则最多可孵育6天。如果在6小时之前测试呈阳性，则表明它是变形杆菌属的一种菌株。
如果是克里斯坦森（Christensen）的尿素琼脂，则应严格接种琼脂斜面而不会刺破。将肉汤以相同方式温育和解释。
质量检查
可以使用对照菌株，例如奇异变形杆菌ATCC 43071，肺炎克雷伯菌ATCC 7006003，大肠杆菌ATCC 25922和鼠伤寒沙门氏菌来测试该培养基。前两个应该给出正面结果，而后两个应该给出负面结果。
资料来源：Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
参考文献
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- Koneman E，Allen S，Janda W，Schreckenberger P，Winn W.（2004年）。微生物学诊断。第五版。社论Panamericana SA阿根廷。
- 大不列颠实验室。Christensen Medium（尿素琼脂基质）2015.Available at：britanialab.com