的连四硫酸盐肉汤或液体培养基TT是用于沙门氏菌属菌株的富集和回收选择性液体培养基。它是由Müeller创建的，后来由Kauffmann进行了修改，这就是为什么有人将其称为Müeller-Kauffmann汤的原因。
原始培养基包含蛋白p，碳酸钙和硫代硫酸钠。考夫曼（Kauffmann）向其中添加了胆盐，并创造了另一种具有亮绿色的形态。这些物质抑制大肠菌群的生长，使培养基自由释放致病细菌（在此情况下为沙门氏菌）。
将碘碘溶液添加到四硫代肉汤中。资料来源：Manuel Almagro Rivas
修饰非常成功，因为它显着提高了介质的灵敏度。因此，目前可用于在任何类型的样品中搜索沙门氏菌，特别是对于固体或液体粪便和食物。
其准备工作分为两个阶段。市售培养基是制备四硫代酸盐肉汤的基础，随后，为了形成四硫代酸盐，添加碘化碘溶液以完成培养基。
美国公共卫生协会（APHA）建议使用添加了鲜绿色的四硫代肉汤来富集沙门氏菌样品，因为它比四硫代肉汤和亚硒酸盐肉汤更具选择性。
通常，当怀疑沙门氏菌属细菌的存在量小或因暴露于抑制性物质或通过使其生存力最小化的工业过程而被滥用时，四硫酸盐肉汤是理想的。
基础
存在的蛋白correspond对应于酪蛋白的胰腺消化物和动物组织的消化性消化物。这些为细菌的生长提供了碳，氮和一般营养素的来源。
就其本身而言，硫代硫酸钠与碘溶液反应形成四硫代硫酸钠。这抑制了大肠菌的生长，并促进了含有四硫酸盐还原酶的细菌的发展，其中包括沙门氏菌属，还有变形杆菌。
胆汁盐还对大多数革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌（大肠菌）具有抑制作用。
碳酸钙吸收四硫酸盐分解产生的有毒物质，形成硫酸。从这个意义上讲，碳酸钙会中和酸度，从而保持培养基的pH值稳定。
在亮绿色的情况下，该物质通过抑制沙门氏菌属以外的微生物来提高四硫代肉汤的选择性。
制备
-四硫代肉汤
碘碘溶液
衡量：
- 碘6克。
- 5克碘化钾。
将碘化钾溶解在大约5 ml无菌蒸馏水中，然后在加热混合物的同时一点一点地添加碘。完全溶解后，用无菌蒸馏水补足刻度，直至最终体积为20 ml。
四硫酸盐肉汤的基础培养基
称重46克脱水培养基，并悬浮于1升无菌蒸馏水中。混合并加热直到完全溶解，它只能沸腾几分钟。不要高压灭菌。使培养基的基础冷却至约45℃，并在此时添加20ml的碘化溶液。
将碘溶液加到培养基中后，应立即使用。如果您不想使用整个混合物，请按照下列步骤操作：
将10 ml的基本培养基分配到试管中，仅向要接种样品的试管中添加0.2 ml的碘化溶液。
那些不使用的容器仍可以存储在冰箱中，但是由于没有对介质进行灭菌，所以理想的是准备所需的确切数量。
加入碘化碘溶液之前，培养基的颜色为乳白色，有白色沉淀，加入后为棕色，有浓稠的沉淀。观察到的沉淀是正常的，对应于不溶解的碳酸钙。培养基的最终pH为8.4±0.2。
-具有明亮绿色的四硫代硫酸盐肉汤变体
为了制备亮绿色的四硫代乙酸盐肉汤，进行了上述所有步骤，但是另外，将10ml以0.1％制备的亮绿色溶液添加到混合物中。
闪亮的绿色
该解决方案的准备如下：
称出0.1克鲜绿色，并将其悬浮在100毫升蒸馏水中。加热至沸腾以达到完全溶解。存放在琥珀色瓶中。
用
对于粪便样品（粪便培养），规程如下：
在试管中接种1 g固体粪便或1 ml液体粪便，并加入10 ml即用型四硫代肉汤。剧烈摇晃并在43°C需氧条件下孵育6-24小时。
随后，取10至20 µl的肉汤等分试样，并在沙门氏菌的选择性培养基（例如SS琼脂，XLD琼脂，鲜绿色琼脂，Hektoen肠溶琼脂等）中进行传代培养。
同时，应将沙门氏菌的选择性培养基接种直接样品（粪便）而不进行浓缩。对于直肠拭子标本，将收集的材料排入试管中，然后按上述步骤进行。
对于食物样品，称量10 g固体食物或10 ml液体食物，并在瓶子中接种100 ml即用型四硫代肉汤。以与上述相同的方式进行，但在37°C下孵育。
可以看出，样品与肉汤之间的关系将始终为1:10。
质量检查
已知的对照菌株可用于测试培养基。使用最广泛的是经ATCC认证的菌株。
所使用的菌株是鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028，黑僵菌沙门氏菌DSM 4224，肠炎沙门氏菌ATCC 13076，大肠杆菌ATCC 25922，粪肠球菌ATCC 19433和金黄色葡萄球菌ATCC 25923。
沙门氏菌菌株有望获得优异的生长，而大肠杆菌可能生长缓慢或规则，而革兰氏阳性菌株（肠球菌和葡萄球菌）则受到部分或完全抑制。
建议
-由于这种培养基不会抑制变形杆菌的生长，因此一些实验室使用40 mg / L的新生霉素来防止这种微生物菌株的发展。必须在碘溶液之前添加抗生素。
-准备好含碘碘溶液的培养基后，接种时间不应超过2小时。
-将介质分配到试管中时，必须将混合物连续均质以重悬所形成的沉淀物。
-在污染较少的样品中，将四硫酸盐肉汤在35-37°C下孵育，在污染严重的样品中，建议在43°C下孵育。
参考文献
- 康达Pronadisa实验室。2010。根据Müeller-Kauffmann的四硫代肉汤基料。适用于：
- BD实验室。2003。四硫代肉汤碱。适用于：
- 大不列颠实验室。2015。Tetranate基础肉汤。适用于：
- BBL Media。2005。准备用于培养沙门氏菌的试管中。
- 福布斯（Forbes B），萨姆（Sahm D），韦斯菲尔德（Weissfeld）A.（2009）。Bailey&Scott微生物学诊断。12版。社论Panamericana SA阿根廷。
- Flores-Abuxapqui J，Puc-Franco M，Heredia-Navarrete M，Vivas-Rosel M，Franco-Monsreal J.亚硒酸钠和四硫酸钠的培养基在37°C和42°C孵育25从携带者的粪便中分离出沙门氏菌。生物医学杂志2003； 14（4）：215-220