的磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲盐水或BPS是缓冲等渗的，其功能是来保持pH值和渗透压为接近自然生物环境（生理的）。缩写PBS代表磷酸盐缓冲盐水。
PH和渗透压是在某些实验室规程中必须控制的两个非常重要的方面。在pH值的情况下，必须对其进行控制，尤其是在生化反应中，因为如果反应物的pH值不合适，这些反应可能会发生变化或不发生。
PBS磷酸盐缓冲液在两个不同的pH值下。资料来源：Pixinio.com
同时，渗透压的控制是必不可少的，尤其是在与活细胞一起工作时，因为细胞的质膜会根据发现它们的溶质的浓度发生反应。
如果将细胞转移到高渗介质中，它们将脱水，因为水梯度将被转移到溶质浓度更高的一侧。另一方面，如果将细胞放置在低渗介质中，则细胞将吸收液体直至被溶解。
这就是为什么PBS缓冲液用于需要在体外维持细胞的实验室规程的原因，因此不会损坏细胞。
PBS由盐的组合组成，例如氯化钠，磷酸钠，氯化钾和磷酸钾。PBS的组成可能会根据实验方案而有所不同。
基础
基本上，磷酸盐缓冲液的功能是保持恒定的生理pH值，以及与体内类似的电解质浓度。
在这种环境下，由于能够尽可能地模拟生理条件，因此细胞能够保持稳定。
如果需要，可以将其他化合物添加到原始PBS制剂中，例如，在交叉不相容性测试中，将EDTA添加到缓冲液中可用于洗涤红细胞。
EDTA可防止血清中存在的补体C1部分被裂解并溶解到红细胞中，也就是说，它避免了错误的不相容性结果。此外，EDTA有助于解离细胞。
制备
制备PBS磷酸盐缓冲盐水时必须称量的盐量将取决于需要制备的量：
-磷酸盐缓冲盐水溶液（10X PBS）
对于一升溶液：
衡量：
80.6克氯化钠，
2.2克KCl，
11.5克Na 2 HPO 4，
2.0克KH 2 HPO 4
准备技术
将重盐放入烧杯中，加足量的水（80％），用磁力棒在搅拌板上混合，直到盐溶解。
使用带有磁力棒的搅拌板制备PBS。资料来源：用户：Ruhrfisch，维基百科。com
过滤除去不溶的颗粒。使用孔径为0.45 µm的过滤器。高压灭菌并在带有盖的玻璃罐中的层流通风橱中进行无菌分配。
10X溶液（浓缩）不能调节pH。稀释至1X PBS缓冲液浓度（1:10稀释）后进行调整。
-缓冲磷酸盐盐水（1X PBS）
1X PBS可以直接制备，称量相应量的每种盐，也可以通过用无菌蒸馏水稀释储备溶液（1:10）来制备。
-要直接制备一升1X PBS磷酸盐缓冲盐水，请称重：
8.06克氯化钠，
0.22克氯化钾，
1.15克Na 2 HPO 4，
0.20克KH 2 HPO 4
准备技术
按照浓缩溶液中的说明进行操作。随后，必须调节pH。为此，测量pH值，并根据结果使用酸（HCl）或碱（NaOH）分别根据需要降低或提高pH值，直到达到7.4。
在使用pH计监控溶液的pH值的同时，逐滴添加酸或碱。根据需要过滤，高压灭菌并无菌分配到锥形管或广口瓶中。
-要从10X储备溶液中制备1X PBS，请执行以下操作：
进行1:10的稀释。例如，要制备1升1X PBS，请量取100毫升储备溶液并添加700毫升无菌蒸馏水。调节pH值，并加水至1000 ml。
制备的PBS缓冲液无色透明。
每日PBS可以在室温下保存，其余的则保存在冰箱中。
pH调节解决方案
盐酸
对于100毫升的1摩尔盐酸（盐酸）。
量取91毫升蒸馏水，并将其放入250毫升烧杯中。
量取8.62 mL浓HCl，然后将其缓慢加入盛有水的烧杯中（切勿相反）。处理强酸（高腐蚀性物质）时，请采取适当的生物安全措施。
混合5分钟，最好使用玻璃内部带有磁力棒的搅拌板。转移到100 ml的烧瓶中，并用蒸馏的H 2 O 补充至100 ml 。
氢氧化钠
对于100毫升的NaOH（氢氧化钠）10摩尔。
量取40 mL蒸馏水，并将其放入250 mL的烧杯中。量取40克NaOH，然后加到水中。使用带有磁力棒的搅拌板在玻璃杯中混合。
转移至100 ml容量瓶中，并用蒸馏水补足刻度。遵守生物安全法规，因为该反应是放热的（它以热的形式释放能量）。
如果您要准备其他数量的磷酸盐盐水溶液，可以参考下表：
资料来源：《 UASLP医学院病毒与人类基因组学实验室》
应用领域
它主要用于细胞生物学，免疫学，免疫组织化学，细菌学，病毒学和研究实验室。
它是通过离心（红细胞），细胞单层洗涤，在光谱椭偏技术中，在细菌生物膜定量中，在维持病毒细胞培养中，作为间接免疫荧光技术中的洗涤液进行细胞洗涤的理想选择以及鉴定单克隆抗体的技术。
它还可用于运输细胞或组织，用作细胞计数的稀释剂，制备细胞酶（胰蛋白酶），用作生物分子干燥方法的稀释剂以及制备其他试剂。
另一方面，Martin等人在2006年证明PBS可用于法医学实验室，特别是从阴道涂片中回收精子，或从阴茎涂片中回收阴道细胞。这样可以确定是否存在性关系。
局限性
-某些PBS缓冲液含有一种称为叠氮化钠的物质作为防腐剂。如果该化合物与铅或铜接触，则可能产生爆炸性物质。因此，将这种试剂排入下水道时必须格外小心。如果以这种方式丢弃，则必须添加大量水以尽可能地稀释它。
-不应将锌添加到磷酸盐缓冲液中，因为它会导致一些盐沉淀。
-Wangen和合作者在2018年确定，PBS的使用不适合洗涤从外周血中提取的急性髓细胞性白血病（AML）的原代细胞，原因是许多细胞因裂解而丢失，材料大大减少了蛋白。
因此，他们确定原液AML细胞在液氮中保存后不应用PBS洗涤。
参考文献
- Coll J.（1993）。病毒学诊断技术。EdDíazde Santos。360 pg
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