该苏木精-伊红是用染料伊红的组合染色技术。这对染料非常完美，因为苏木精是碱性染料，曙红是酸性染料。
碱性或酸性染料的名称不是指在溶液中获得的pH值，而是根据其拥有的阴离子或阳离子电荷或发色团的位置来说明占主导地位的比例。
苏木精-曙红（HE）染色的纤毛柱状上皮来源：托德·斯特劳斯和弗拉基米尔·奥西波夫
从这个意义上讲，苏木精被认为是碱性（阳离子）染料，因此对酸性结构（例如细胞核）具有亲和力。曙红是一种酸性（阴离子）染料，对碱性或碱性结构（例如细胞质）具有亲和力。
由于这个原因，这种染料组合被广泛用于组织染色，因为它可以清楚地区分细胞核和细胞质。细胞核染成深蓝色或紫色，胞质染成粉红色。
苏木精-伊红染色由于易于处理且成本低廉，是组织学和细胞学领域最广泛使用的染色技术之一。它用于可视化细胞，粗大的神经纤维以及组织中某些微生物的存在，例如：寄生虫，真菌和细菌等。
特点
苏木精
苏木是中性染料。但是，提供颜色（生色团）的组分位于分子的阳离子或碱性中心。因此，它对酸结构的亲和力。其化学式为C 16 H 14 O 6，科学名称为7,11b-二氢茚并色烯-3、4,6a，9,10（6 H）-戊醇。
它主要染色细胞核，因为它们的核酸非常丰富。它也可以染色病毒来源的细胞质内含物。
为了使苏木精染色，它必须处于氧化状态并与金属结合。后者将用于固定在组织上，也就是说，它将起媒染剂的作用。
当苏木精被氧化时，称为苏木精。氧化是通过将试剂暴露于氧气（老化）中或通过有助于其氧化（化学氧化）的物质来实现的。
曙红
曙红是一种染成红色或粉红色的染料。尽管有水溶性版本，但它不溶于水。通常，曙红是通过溶于乙醇（95°乙醇）中制备的。
它染色细胞质，肌纤维，细胞质细胞器和胶原蛋白，但不染色细胞核。这是因为它带负电，因此对带正电的结构具有亲和力。
曙红有“ Y”和“ B”两种类型。曙红“ Y”被称为黄色曙红。它的科学名称是四溴荧光素，化学式为C 20 H 8 Br 4 O 5。
另一方面，曙红“ B”有时也被称为蓝色赤藓红B。它的科学名称是二溴代亚硝基氟树脂，分子式为C 20 H 8 Br 2 N 2 O 9。两者非常相似，使用一种或另一种之间的区别并不是很明显。但是，最受欢迎的是曙红“ Y”。
曙红具有区分活细胞和死细胞的特性，因为它仅能在细胞死亡时穿过细胞膜以染色其细胞质，如果细胞保持存活，则其细胞质将变为无色。
应用领域
神经纤维染色
厚的神经纤维可被苏木精-曙红染色并鉴定。但是，这对于染色细神经纤维没有用，因为需要对其进行银染以使其可视化。
组织学皮肤切片污渍
在皮肤的角质层染色中，起作用的染料是曙红，因为在这个水平上，细胞没有细胞核。
在皮肤的颗粒层中，苏木精将颗粒细胞内的角质透明质蛋白颗粒强烈染色。相反，苏木精对皮肤的棘突层染色较弱，而基础或生发层则相当染色。
曙红使所有细胞的细胞质染色，颜色的强度会因层而异。
粪便样本的苏木精-伊红染色
Gómez等人，在2005年证明，在急性腹泻患者中，苏木精-曙红染色比新鲜的可视化方法（盐水和卢戈尔）更能有效地识别出因溶血性变形杆菌和变形杆菌引起的阿米巴病。
它也显示出对检测红细胞吞噬作用（吞噬红细胞的变形虫）高度敏感。
组织切片染色以诊断感染
Walwyn等人，在2004年提出使用组织学染色剂来检测引起感染的微生物。
使用苏木精-伊红染色，他们可以观察到由梭状芽胞杆菌，放线菌，螺旋藻或念珠菌引起的感染。他们还能够通过各种组织切片中的巨细胞病毒和疱疹观察到皮肤切片中存在寄生虫Sarcoptes escabiei，病毒包涵体。
技巧
用于组织学样本
组织切片染色需要经过一系列步骤。首先是获得组织学切片。必须打蜡，以后才能用切片机获得切口（超细）。该技术包括以下步骤：
1-消除多余的石蜡：为此，您可以使用二甲苯酚或Heme-D，浸泡3-5分钟。
2-样品的再水化：这是通过将样品按降序（100°，90°，70°）浸入不同浓度的醇（乙醇）中来实现的。在所有情况下持续7分钟。
3-消除过量的酒精：为此，将其浸入水中7分钟。
4-用苏木精染色：将样品浸入装有苏木精的托盘中6-10分钟。曝光时间取决于样品的大小和厚度。
5-消除过量的苏木精：将其用水洗涤5分钟，然后通过酸性醇快速通过（10-20秒）。之后，再次用水洗涤5分钟。然后将其浸入96°乙醇中1分钟。
用曙红进行6-染色：为此，将样品浸入曙红托盘中5分钟。
7-样品脱水：要进行此操作，它会通过酒精托盘（乙醇），但是这次是按升序进行的。（70°，90°，100°）。（分别为5秒，5秒，1分钟）。
8-澄清样品：为此，将其暴露于二甲苯中5-10分钟，然后干燥以永久用加拿大香脂或其他类似材料密封。
寻找粪便样本
用患者的大便在载玻片上涂片并用80％酒精固定5分钟。将该片浸入苏木精中5分钟，并立即用水洗涤。
随后，将其快速浸入酸性酒精中，然后浸入氨水中。用水洗净。在曙红中着色5分钟。如现有技术中所述将样品脱水，最后用二甲苯冲洗。
试剂的制备
-苏木精
在一升蒸馏水中溶解50克硫酸钾或硫酸铝铵。完全溶解后，加入1克结晶的苏木精。完全溶解后，将1 g柠檬酸与50 g水合氯醛和0.2 g碘酸钠一起加入。
将混合物煮沸5分钟，然后冷却并过滤以除去任何残留的固体颗粒。这样制备的试剂可以立即使用。
-曙红
它可以用酒精基或水基制备。
酒精曙红
在100 ml乙醇中于95°溶解0.5 g曙红“ Y”。然后加入几滴冰醋酸。
2％曙红水溶液
在1250毫升蒸馏水中溶解25克水溶性曙红“ Y”。然后加入几滴冰醋酸。
酸性酒精
量取0.5毫升浓盐酸，并用无水酒精补足100毫升。
氨水
量取0.5 mL浓氨水，并用蒸馏水补足至100 mL。
参考文献
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