血液涂片：特征，类型，技术和组织学 - 生物学 - 2024

的血涂片是外周血涂片，用于分析存在于血液循环的组件。血液涂片的观察提供了血液学数据，对于许多病理学的诊断和随访非常有用。

血液涂片可以量化不同类型的白细胞（白细胞配方）的数量，并分析红细胞，白细胞和血小板的形态和​​形状。

准备血液涂片。来源：实验室玻璃杯中的血液。公共DomainPictures.net

其中，可以检测到细胞数量异常，例如：白细胞增多症或白细胞减少症，淋巴细胞增多症或淋巴细胞减少症，嗜中性粒细胞减少或中性粒细胞减少，血小板增多症或血小板减少症和嗜酸性粒细胞增多。还可看到细胞大小和形状异常。

另外，可以检测各种类型的贫血，白血病和细菌或血液寄生虫感染。

为此，根据研究目的进行了多种涂片检查。有薄涂片和厚涂片。这些涂片的执行技术和研究目的不同。

那些细小滴剂可作为辅助血液学的辅助工具。除了分析组成血液的三个细胞系列（红色系列，白色系列和血小板）的形状和形态外，它还提供了有关白细胞配方的数据。尽管它们还可以作为厚膜研究的补充。

厚膜用于诊断由血液寄生虫引起的疾病，例如疟疾或疟疾，弓形虫病，利什曼病，查加斯病，巴贝虫病和微丝虫病。

血液涂片的特征

良好的血液涂片必须符合某些特征。其中我们可以提到：

-样品必须满足最低质量要求才能具有代表性。

-采样必须执行良好。

-及时执行涂片检查。

-如果使用静脉血进行涂片，请使用不会使细胞变形的抗凝剂并混合试管。

-如果使用毛细血管血液，则丢弃第一滴。

-点差必须均匀。这样可以确保细胞均匀分布，并且可以很好地分析血细胞的形状和数量。

-涂片的侧面从头到尾应该是光滑的。

-涂片必须在滑块侧面留出1到2毫米的空白。

-涂抹层的厚度应从头到尾逐渐减小（通过滑动方法涂抹时会有细微的掉落）。

-必须正确贴标签，以免造成样品混淆。

-固定并正确染色，以清晰观察血液成分。

-在显微镜下安装制剂之前，应使涂片非常干燥。将浸油涂在湿的涂片上会导致形成胶束，从而阻止看到细胞。

血液涂片类型

外周血涂片可分为薄涂片和厚涂片。具有薄层的那些用于研究白细胞配方和血细胞的形态观察。还可以看到胞外细菌，如疏螺旋体和胞内血寄生虫，如疟原虫。

在细小斑点中，可以鉴定出寄生虫的种类，因此，它是一种比浓稠斑点更具体的技术，但浓稠斑点更灵敏，因为它是一种用于彻底搜索细胞外血寄生虫的浓缩技术。

细滴涂片有两种类型：在载玻片上进行的和在盖玻片上进行的。厚涂片在幻灯片上进行。

采血技术

血液涂片可通过毛细管穿刺或抗凝剂抽取静脉样本制成。如果是从血液中加入抗凝剂进行的，则在取样后最多2个小时可进行涂片检查。

应注意使用不会使血细胞变形的抗凝剂。最好的选择是EDTA。相反，应避免使用抗凝剂，例如柠檬酸三钠。

如果通过毛细管穿刺取样，则应在血块凝结之前立即延长涂片时间。

第一个液滴应丢弃，使下一个液滴自发逃逸，以避免样品被组织液稀释。由于血液中没有任何添加剂，因此最推荐用于观察细胞形态的技术。

为了观察血寄生虫，Solari等人在他们的研究工作中得出结论，两种技术（静脉穿刺和毛细管）都同样有效。

血液采样类型：A.毛细管穿刺。B.静脉穿刺。资料来源：A. Flickr.com B. Pxhere.com

血液涂片准备技术

血液涂片可以在显微镜载玻片或盖玻片或载玻片上手动进行。也可以通过自动化设备来实现。

-幻灯片涂片

由于它易于处理，因此是大多数实验室首选的技术。

使用巴斯德吸管，在干净的载玻片一端的中央放一滴不太浓或很细的血。

涂抹是借助另一只带有接地端的幻灯片进行的。毛玻璃载玻片的位置垂直于墨滴所在的另一端。

它倾斜30至45°之间的角度，并朝着液滴滑动；当触摸时，它会在地面滑轨的边缘线性扩展，并以恒定且确定的运动返回纸张。在到达末端之前，将滑块抬起。

这样，均匀的层散布在接收载玻片的表面上。

允许涂抹变干。然后将其固定并用首选染色剂染色。在显微镜下观察之前，请使其充分干燥。将一滴油放在显示涂抹的脸上，并在光学显微镜下观察。

幻灯片上有血迹。上图：未染色的涂片。下部图像：涂片染色。资料来源：Coinmac

幻灯片上的涂片部分

在这种类型的涂片中，可以区分三个定义的区域：头部，身体和尾巴。头部对应于涂片开始的区域，它是最厚的区域，不好观察。

身体是涂片的中央或中间部分，是在显微镜下观察的最佳区域，因为那里的细胞均匀分布并且保留了其形态。

尾巴与涂片的最后部分相对应。在此，分布不再均匀，并且倾向于丢失红细胞形态。

滑动技术中的质量控制

在这项技术中，它起着基本作用：

-载玻片的清洁和脱脂：保证样品的良好滑动。

-滴的大小：滴很大时，会获得较厚和更长的涂片；滴很小时，则涂抹会更短且非常细。

-分机中应用的速度：涂片越薄的速度越低，涂片越厚的速度越高。

-执行角度：角度越小涂片越细，角度越大越厚。

-踩盖玻片

由于易碎的盖玻片的处理很麻烦，因此没有得到广泛使用，但是由于在整个涂片中获得了更好的细胞分布，它具有很大的优势。

在盖玻片的中心放置一个不太厚，不太细的液滴。立即将另一个盖玻片置于其上，以使两个盖玻片的尖端均突出，形成星形。

液滴将自发散布在两个盖玻片的表面。在扩展的末端，每个滑片都快速滑到彼此的另一侧（一个滑到右边，另一个滑到左边）。

该技术提供两个涂片而不是一个。

将它们晾干，涂抹面朝上。干燥后，将其固定并用所选技术染色。晾干。将一滴浸没的油放在载玻片上，将涂片的一面朝下放置，并在显微镜下观察。

盖玻片技术中的质量控制

要获得此技术的良好涂片，重要的是：

-清洁盖玻片（有助于样品平滑滑动）。

-液滴的大小（影响涂片的厚度）。

-盖玻片分离的速度（影响涂抹的均匀性）。

-配备自动化设备

可以通过以下任何一个团队完成操作：Spinner和Autoslide。

旋转器包括将载有血液的载玻片放在特殊的离心板上。样品高速离心。以这种方式形成了均匀且精细的样品涂片。它具有样品可能溶血的缺点。

自动滑片是一种机械地执行移动以在滑片上执行涂抹的工具。您也可以修复并弄脏污迹。它甚至可以适应某些自动血液学计数器。

浓涂技术

要搜索寄生虫，建议进行两次涂片检查：一次涂上细滴，一次涂上浓密。

进行毛细管穿刺，清洁第一滴。如前所述，将细微的液滴放在幻灯片上并涂抹。对于厚的珠子，将大珠子放在另一张幻灯片上，并展开为1.55mm的正方形。让两个涂片变干。

涂片染色

Giemsa或Wright污渍可用于滴细滴。建议将Giemsa或May-Grunwald Giemsa染色用于较厚的涂片。

吉姆萨染色

用甲醇将涂片固定3分钟，将其排干并再次干燥。然后用吉姆萨染色剂覆盖涂片10-15分钟。用蒸馏水洗涤并干燥。为了在显微镜下观察，放了一滴浸油。

赖特的污点

该涂片用赖特氏染色剂覆盖5分钟。丢弃缓冲液并将其在pH 6.8下放置6分钟。吹匀制剂。用蒸馏水洗涤并干燥。在显微镜下观察。

缺陷涂片的类型

它发生在受训者使用幻灯片的精细下降技术中。

具有不同厚度区域的涂片（薄而厚的点缀）

这是因为在扩展过程中执行的运动不是恒定的，因此会停止并重新启动。

涂片涂片很短

它们有两个原因：一个是由于地面滑轨在到达滑轨的另一端之前已经被提起。在这种情况下，它非常粗短。

另一方面，如果污迹短而细，则是因为液滴的大小很小。

在拖尾即将开始时用倾斜的区域涂抹

原因有以下几种：一种是接地边缘有缺陷，在展开时施加在接收滑块上的压力增加，或者滑块的接地边缘已磨损。

涂片形成液泡或透明的圆形或椭圆形区域

这是由于使用了油腻的涂片（未充分清洗和脱脂）。

非常厚或非常薄的涂片

太大的液滴会从头到尾产生很浓的污迹，很小的液滴会产生非常细的污迹。

组织学

在血液涂片中可以看到血细胞。其中包括：

-红细胞或红细胞

人血，红细胞或红细胞和两个白细胞。摘自和编辑：维亚斯科斯，您的观察至关重要。在此水平上，可以检测到贫血，地中海贫血，骨髓疾病等。

男性的红细胞或红细胞的数量约为5 x 10 ⁶ mm3，女性的约为4.5 x 10 ⁶。红细胞的形状像双凹盘，具有中央生理苍白。可以分别看到它们（正常）或形成rouleaux堆栈（异常）。

涂片还可以显示嗜红细胞增多症（各种形状的红血球），异嗜性细胞增多症（各种大小的红血球），异嗜性红细胞增多症（各种形状和大小），异色症（不同颜色），成红细胞（不成熟的红血球），微细胞增多症（较小的红血球） ）和大细胞（较大的红细胞）。

当他们表现出血红蛋白量不足并且中央苍白增加时，据说存在色差。当观察到正常的红色系列时，将报告为正常的和正常变色的。

-白细胞或白细胞

白血细胞

正常量为5,000至10,000mm ³。它们在感染过程，过敏和白血病中发生改变。血液涂片可以区分几种类型，下面将对此进行说明。

分段中性粒细胞

它们代表总白细胞的55-65％。它们的尺寸在10-15μm之间。它们的核呈分段或裂片状，并具有不同的形态，因此被称为多形核。

它们在细胞质和一些嗜蓝细胞中具有丰富的嗜中性粒细胞。它们增加细菌感染（中性粒细胞增多），减少病毒感染（中性粒细胞减少症）。

可以观察到形态异常，例如多核细胞增多（细胞核超节），牙弓（未成熟细胞）或宏观策略（卵形和大卵形）。

其他变更：

-有毒颗粒

-伪Pelger中性粒细胞（细胞核不分瓣或不分瓣）。

-Döhle体：深蓝色细胞质内含物。

-增加了细胞质的嗜碱性。

-胞浆内空泡。

-细胞野餐（核间桥丢失）。

分段嗜酸性粒细胞

它们代表总白细胞的1-3％。它们的尺寸为9-10μm。它们的特征在于存在丰富的嗜酸细胞质颗粒和很少的嗜铁粒细胞。它的核有两个小叶。它们的数量增加，导致过敏和寄生虫病。

分段嗜碱性粒细胞

它们极为罕见，占白细胞的0-1％。它们的尺寸为10-12μm。细胞核的边缘通常是不规则的，可能呈双叶状，但由于细胞质中存在大量嗜碱性粗粒，因此未观察到。很少见到嗜碱性粒细胞增多。

淋巴细胞

它们是具有嗜碱性细胞质的小细胞，细胞核清晰，圆形，染色质浓缩。原子核几乎涵盖了整个细胞。它们代表血液白细胞的26-40％。它们增加病毒感染（淋巴细胞增多）。可以看到反应性淋巴细胞。

单核细胞

细胞大于淋巴细胞，具有较大的细胞质和较松散的椭圆形染色质核。它们的尺寸为9-12μm。细胞质丰富，通常采用标准染色技术可显示浅灰蓝色。在这些改变中可以观察到空泡的单核细胞和单核细胞增多。

-血小板

它们的尺寸在1.5-3μm之间。它的形状是圆形或椭圆形。正常值范围为150,000至350,000血小板/ mm3。它们可以减少某些病毒感染。它们没有核，呈紫色。在该系列中可以看到异常，例如大血小板或微血小板，血小板减少症或血小板减少症以及血小板碎片。

病理因素

血液寄生虫

血液涂片中可能会见到血液寄生虫，例如疟疾或疟疾的致病原（疟原虫属的寄生虫）。因此，手动检查拖影很重要，因为自动设备会错过这一发现。

菌

在诸如复发性发热或莱姆病的病理中，可以观察到其病因。在这种情况下，其对应于血液涂片中的疏螺旋体螺旋体和疏螺旋体。

未成熟的细胞

在白血病，类白血病反应和白血红细胞生成反应等中观察到严重病例。在细菌感染中，左侧可能会略有偏离（存在弯曲）。在某些贫血中也可能见到成红细胞。

参考文献

1. 血液和造血组织。可用在：sld.cu
2. 戈麦斯A，卡萨斯M.，2014年。天使。临床实验室解释。第8版。社论MédicaPanamericana。
3. Solari Soto L，Soto Tarazona A，Mendoza Requena D，Llanos解释A.比较厚静脉滴血与指压的寄生虫密度在诊断间日疟中的比较。牧师在这里2002；13（4）：140-143。可在以下网站找到：scielo.org。
4. 特里·伦纳德·纳尔逊（Terry Leonard Nelson），门多萨·埃尔南德斯·卡洛斯（MendozaHernándezCarlos）。研究老年人外周血涂片的重要性。Medisur 2017; 15（3）：362-382。可用在：scielo.sld
5. Grinspan S.对外周血涂片的研究。继续医学教育。网址：bvs.hn/RMH